不同培養(yǎng)體系對(duì)牛卵母細(xì)胞體外成熟及克隆胚發(fā)育率的影響.pdf

1、本研究中，試驗(yàn)一:探討了不同的因素對(duì)牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響，目的是篩選出一套適合本實(shí)驗(yàn)室條件下細(xì)胞核移植的卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)成熟體系;試驗(yàn)二:探討了不同的培養(yǎng)條件對(duì)牛核移植重構(gòu)胚體外發(fā)育的影響，目的是優(yōu)化牛核移植重構(gòu)胚的體外培養(yǎng)體系，進(jìn)一步提高牛核移植重構(gòu)胚的體外發(fā)育率和胚胎的質(zhì)量。
　　 結(jié)果如下:
　　 1、試驗(yàn)一:探討了卵泡直徑(2-4mm、4-6mm、6-8mm、＞8mm)、成熟培養(yǎng)時(shí)間、卵巢性周期以及卵丘細(xì)胞對(duì)

2、牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響。結(jié)果表明:2mm≤D≤8mm的卵泡中的卵母細(xì)胞成熟率明顯高于8mm＜D卵泡中的卵母細(xì)胞的成熟率(P＜0.05)。將隨機(jī)分成三組的卵母細(xì)胞分別培養(yǎng)18h（Ⅰ組）、22h（Ⅱ組）和24h（Ⅲ組），Ⅰ組成熟率(68.2％)顯著低于Ⅱ組(78％)和Ⅲ組(81.8％)(P＜0.05)。采集卵泡期卵巢中的卵母細(xì)胞進(jìn)行體外成熟培養(yǎng)，卵母細(xì)胞的體外成熟率(81.7％)要明顯高于黃體期卵巢中卵母細(xì)胞的體外成熟率(70.6％)(P

3、＜0.05)。卵丘—卵母細(xì)胞復(fù)合體(COCs)的質(zhì)量影響卵母細(xì)胞的體外成熟，A、B、C三級(jí)卵母細(xì)胞成熟率分別是87.3％、76.2％、29.2％，AB之間差異顯著(P＜0.05)，均與C差異極顯著(P＜0.01)。
　　 2、試驗(yàn)二:探討了不同的培養(yǎng)條件對(duì)牛核移植重構(gòu)胚體外發(fā)育的影響。分為4個(gè)小試驗(yàn)。試驗(yàn)Ⅰ:探討谷光甘肽對(duì)牛核移植重構(gòu)胚體外發(fā)育能力的影響，試驗(yàn)組A中添加1mM谷胱甘肽，核移植重構(gòu)胚在體外培養(yǎng)7d，核移植重構(gòu)胚的桑

4、葚胚率(17.0％)、囊胚率(8.5％)明顯的提高與對(duì)照組(1.3％、1.3％)差異顯著(p＜0.05);試驗(yàn)Ⅱ:探討低氧氣濃度(5％)對(duì)牛核移植重構(gòu)胚體外發(fā)育能力的影響，核移植重構(gòu)胚在體外培養(yǎng)7d，試驗(yàn)組A0-3d核移植重構(gòu)胚采用低氧氣濃度(5％)條件培養(yǎng)，桑葚胚率(11.8％)、囊胚率(7.8％)明顯的提高與對(duì)照組(1.3％、1.3％)差異顯著(p＜0.05);試驗(yàn)Ⅲ:探討不同的供體細(xì)胞對(duì)牛核移植重構(gòu)胚體外發(fā)育的影響，核移植重構(gòu)胚在