妊娠期高血壓疾病中基質(zhì)金屬蛋白酶-9及其組織抑制物-1、轉(zhuǎn)化生長因子-β1表達關(guān)系的研究.pdf

1、目的:妊娠期高血壓疾病是造成孕期女性和圍生兒患病和死亡的主要原因之一，嚴重影響女性妊娠期各個系統(tǒng)的生理功能及圍生兒的健康發(fā)育。經(jīng)過國內(nèi)外科研工作者們不懈的努力，有關(guān)胎盤或滋養(yǎng)細胞缺血、免疫、遺傳及氧化應激等幾個方面的學說被認為是導致該病的主要原因，其中人們一般認為胎盤或滋養(yǎng)細胞缺血在發(fā)病機制中占據(jù)關(guān)鍵地位。妊娠是一個極為復雜多變的生理過程，在這個過程中多種原因造成滋養(yǎng)細胞不能充分完成浸潤過程，子宮螺旋動脈生理性重鑄過程不能充分地進行，胎

2、盤不能深入植入引起胎盤缺血?；|(zhì)金屬蛋白酶-9(martix metalloproteinases-9，MMP-9)可快速有效的降解細胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)，是滋養(yǎng)細胞充分浸潤過程中的重要角色，參與了子宮螺旋動脈重建和胎盤形成。基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1)是MMP-9的特異性抑制物，主要作用是可以有效的對

3、MMP-9的含量和活性進行抑制調(diào)節(jié)，滋養(yǎng)細胞的侵襲行為正常進行有賴于兩者含量的平衡表達。發(fā)現(xiàn)于1981年的轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growthfactor-β1，TGF-β1)是一種具有多樣性功能的、由多細胞合成分泌的生長因子，在細胞生長分化、細胞外基質(zhì)生成、炎癥反應、機體免疫、間質(zhì)纖維化和腫瘤血管形成等各方面具有廣泛的調(diào)節(jié)作用。本文的實驗目的是通過研究MMP-9、TIMP-1和TGF-β1在正常對照組、子癇前期輕

4、度組、子癇前期重度組胎盤組織中的表達變化情況，認真探討三者相互聯(lián)系和彼此之間的關(guān)系，仔細分析它們對滋養(yǎng)細胞浸潤過程的影響，詳細闡述它們在妊娠期高血壓疾病中所發(fā)揮的作用，為該病的更深入研究和有效的防范治療提供實驗依據(jù)。
　　方法:
　　1.在2011年12月-2013年6月期間，分別選擇正常對照組、子癇前期輕度和重度患者各30例（三組研究對象均除外其他疾?。?。所有組織全部在胎盤娩出后的30分鐘之內(nèi)采取，采取部位選擇母體面中央、

5、臍帶附著處，采集標本體積約1cm×1cm×1cm，采集時注意無菌操作并避開梗死、出血及鈣化的部位，放置于10％的中性福爾馬林中浸泡24-48小時，包埋在石蠟中，4μm連續(xù)切片。
　　2.應用免疫組織化學（immunohi stochemi stry，IHC）SP法（鏈霉菌抗生物素蛋白—過氧化酶連接法）檢測需要研究的標本中MMP-9、TIMP-1和TGF-β1的表達強度，根據(jù)觀察到的陽性細胞百分比和細胞內(nèi)染色強度分級。
　　3

6、.應用Excel來處理所有的數(shù)據(jù)，并利用SPSS13.0進行統(tǒng)計分析，使用單因素方差分析對計量資料進行分析，計數(shù)資料采用Kruskal-wallis H檢驗、Wilcoxon秩和檢驗及Fisher's精確概率計算，應用Spearman等級相關(guān)分析方法對兩個變量之間的相關(guān)性進行統(tǒng)計分析。采用α=0.05作為檢驗的標準，當P≤0.05時，代表差異有統(tǒng)計學意義;當P≤0.01時，表示差異的統(tǒng)計學意義非常顯著。
　　結(jié)果:
　　1.

7、臨床一般資料比較:本實驗研究的三組孕婦中，其平均年齡和平均分娩孕周的差異均沒有統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　2.MMP-9的表達
　　2.1 MMP-9集中分布在合體滋養(yǎng)細胞、蛻膜細胞、絨毛的間質(zhì)細胞和血管內(nèi)皮細胞中，主要是在這些細胞的細胞膜和細胞質(zhì)中表達。MMP-9表達在子癇前期輕度組和重度組中的陽性率依次是70.00％、36.67％，與正常對照組的96.67％陽性率相比，均表現(xiàn)顯著差異(P=0.014＜0.05，P=

8、0.001＜0.05)。
　　2.2 MMP-9在對照組、輕度組和重度組中都可以表達，但表達的情況在三組中不同，三組表達率相比差異在統(tǒng)計學上具有顯著性意義(P=0.002＜0.05)。更深入的對三者進行兩兩比較，發(fā)現(xiàn):與正常妊娠組相比，子癇前期輕度組、重度組中MMP-9的含量均減少明顯(P=0.013＜0.05，P=0.008＜0.05)，并且伴隨疾病的不斷進展，MMP-9的表達呈降低趨勢:在子癇前期重度組中的表達程度顯著低于輕度

9、組（P=0.015＜0.05）。
　　3.TIMP-1的表達
　　3.1 在所觀察的組織中TIMP-1和MMP-9的分布、陽性顆粒定位基本相同。TIMP-1表達在子癇前期輕度組和重度組中的陽性率依次是73.33％、90.00％，與正常對照組的40.00％陽性率相比，均表現(xiàn)顯著差異(P=0.011＜0.05, P=0.005＜0.05)。
　　3.2 TIMP-1在對照組、輕度組和重度組中都可以表達，但表達的情況在三組中

10、不同，三組表達率相比差異在統(tǒng)計學上具有顯著性意義(P=0.004＜0.05)。更深入的對三者進行兩兩比較，發(fā)現(xiàn):與正常妊娠組相比，子癇前期輕度組、重度組中TIMP-1的含量均增加明顯（P=0.024＜0.05，P=0.018＜0.05），并且伴隨疾病的不斷進展，TIMP-1的表達呈不斷增加趨勢:在子癇前期重度組中的表達程度顯著高于輕度組（P=0.027＜0.05）。
　　4.TGF-β1的表達
　　4.1 所觀察的絨毛的間質(zhì)

11、細胞、蛻膜細胞、滋養(yǎng)細胞的細胞膜和細胞質(zhì)中都出現(xiàn)了TGF-β1的表達，還可以在血管的內(nèi)皮細胞中觀察到數(shù)目略少的表達。TGF-β1表達在子癇前期輕度組和重度組中的陽性率依次是76.67％、93.33％，與正常對照組的33.33％陽性率相比，均表現(xiàn)顯著差異(P=0.010＜0.05, P=0.002＜0.05)。
　　4.2 TGF-β1在對照組、輕度組和重度組中都可以表達，但表達的情況在三組中不同，三組表達率相比差異在統(tǒng)計學上具有顯

12、著性意義(P=0.001＜0.05)。更深入的對三者進行兩兩比較，發(fā)現(xiàn):與正常妊娠組相比，子癇前期輕度組、重度組中TGF-β1的含量均增加明顯(P=0.022＜0.05，P=0.014＜0.05)，并且伴隨疾病的不斷進展，TGF-β1的表達呈不斷增加趨勢:在子癇前期重度組中的表達程度顯著高于輕度組（P=0.036＜0.05）。
　　5.MMP-9和TIMP-1呈負相關(guān),MMP-9和TGF-β1呈負相關(guān)，TIMP-1和TGF-β1呈

13、正相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1.MP-9、TIMP-1和TGF-β1在對照組、子癇前期輕度組和重度組的胎盤組織中均有表達，并且表達強度在三組之間存在顯著性差異。
　　2.MMP-9與TIMP-1、MMP-9與TGF-β1在胎盤組織中的表達呈負相關(guān)，TIMP-1與TGF-β1呈正相關(guān)關(guān)系。在正常對照組中，MMP-9高表達，TIMP-1和TGF-β1低表達;子癇前期輕度組和重度組，MMP-9的表達隨病情發(fā)展而降低，TIMP-