犬超數(shù)排卵及手術法取卵的研究.pdf

1、本實驗的主要內容分為犬的超數(shù)排卵技術、通過外科手術法獲得成熟卵母細胞以及實驗室鏡檢排卵情況三部分。
　　犬的超數(shù)排卵技術是在外源性激素PMSG與hCG的聯(lián)合應用下進行的，選用5只健康未發(fā)情母犬，體重約為5kg，實驗第1天即給母犬注射PMSG，1-8天連續(xù)每天肌肉注射200 IU PMSG,隔3天即第11天肌肉注射2000 IU hCG,隔10天即在第21天通過手術法進行取卵。
　　手術法取卵是以經超數(shù)排卵后的母犬為基礎，采用

2、舒泰50進行麻醉，于臍后沿腹正中線做切口，切開皮膚和皮下組織，暴露腹腔，找到子宮、卵巢以及輸卵管一并摘除，摘除后一并放入保溫瓶中帶回實驗室。
　　實驗室鏡檢排卵情況是先以生理鹽水清洗子宮、卵巢以及輸卵管，剪掉多余組織，從宮管結合部用1mL的針頭注入沖卵液（10mL沖卵液反復沖洗），另一端用平皿接收流出的液體，完成卵母細胞的收集。使用透明質酸酶機械地剝離卵丘細胞從而獲得裸卵，排出第一級體的細胞即為成熟卵母細胞。染色后可以更直觀清晰的