不同時間負(fù)載抗原的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)的抗肝癌效應(yīng).pdf_第1頁
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文檔簡介

1、理論背景:肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是我國最常見的惡性腫瘤之一,死亡率居世界之首,嚴(yán)重威脅我國人民的生命健康。據(jù)1998年全國衛(wèi)生統(tǒng)計年報資料,我國城市男性肝癌的死亡率為30.40/10萬,女性為10.60/10萬,手術(shù)治療對早期患者有肯定效果,而對轉(zhuǎn)移或腹水形成后的患者,不僅手術(shù)困難,術(shù)后復(fù)發(fā)率也很高,放療、化療對肝癌的療效不能肯定,肝癌的臨床治療迫切需要新的方法。近年來,以免疫治療為代表的生物

2、治療作為腫瘤治療的第四模式日益受到重視,作為肝癌治療的重要輔助手段之一,生物治療已逐漸顯示出其獨特的優(yōu)越性。 樹突狀細(xì)胞(dendriticcells,DC)是已知體內(nèi)功能最強(qiáng)的專職的抗原呈遞細(xì)胞(antigenpresentingcells,APC)。DC能有效的攝取,加工及呈遞抗原,并能刺激未致敏T細(xì)胞的增殖與活化,是啟動、調(diào)控并維持體內(nèi)特異性免疫誘導(dǎo)的中心環(huán)節(jié)。制備腫瘤特異性DC腫瘤疫苗,可以有效的激發(fā)特異性的持久的腫瘤免

3、疫誘導(dǎo)。這已經(jīng)成為腫瘤免疫治療的一個熱點,并在臨床研究中取得了令人振奮的成果。 實驗?zāi)康模航⒎€(wěn)定可靠的誘導(dǎo)DC的途徑及調(diào)控其成熟的方法;進(jìn)行肝癌樹突狀細(xì)胞免疫瘤苗的體外實驗,評價不同時間應(yīng)用肝癌細(xì)胞凍融抗原負(fù)載樹突狀細(xì)胞所誘導(dǎo)的抗肝癌效應(yīng)。 實驗方法:采集健康足月剖宮產(chǎn)孕婦胎盤端臍血,分離臍血單核細(xì)胞(cordbloodmononuclearcell,CBMNC)及T淋巴細(xì)胞,用rhGM-CSF、rhIL-4及TNF-

4、a聯(lián)合誘導(dǎo)CBMNC分化為DC,并以流式細(xì)胞儀及免疫組織化學(xué)染色鑒定;在培養(yǎng)周期內(nèi)選取不同時間(第3、4、5、6、7天)用肝癌細(xì)胞凍融抗原負(fù)載CBMNC-DC,以不同時間負(fù)載抗原的DC刺激自體淋巴細(xì)胞活化為CTL,并用CTL對肝癌細(xì)胞進(jìn)行殺傷,MTT測定活化的自體淋巴細(xì)胞的相對數(shù)量和CTL對肝癌細(xì)胞的殺傷效果。 實驗結(jié)果:1、CBMNC在細(xì)胞因子rhGM-CSF,IL-4及TNF-a配伍作用下體外誘導(dǎo)分化為具有典型形態(tài)和表型的D

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