金自組膜核酸及免疫傳感器識(shí)別器的研究.pdf

1、軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院碩士學(xué)位論文金自組膜核酸及免疫傳感器識(shí)別器的研究姓名：姜雄平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：藥物分析指導(dǎo)教師：馬立人;許丹科2000.5.1金魯組驥核酸及免疫傳感器識(shí)翻器的磅究3 ．化學(xué)發(fā)光免疫傳感器固定有兔I g G 的金膜與山羊抗兔I g G 及堿性磷酸酯酶標(biāo)記的山羊抗兔l g G 競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，結(jié)合上的堿性磷酸酯酶催化過(guò)量A M P P D 發(fā)光來(lái)檢測(cè)山羊抗兔I g G 的量。在一定的山羊抗兔I g G 濃度范圍內(nèi)( O 8

2、～8 0 u g ／m 1 ) ，化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度與d J 羊抗兔I g G 濃度的對(duì)數(shù)成反比關(guān)系：L i g h t C o u n t s =2 0 7 4 ．5 —1 0 7 5 ．6 $ L o gC ，F(xiàn) = - O ．9 9 4 2 ，L i g h tC o u n t s 為發(fā)光強(qiáng)度，C 為山羊抗兔I g G 濃度。測(cè)得最低檢出量為0 ．8 I t g ／m l 。4 ．熒光免疫傳感器4 ．1 競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定 固定有兔I g G

3、 的金膜與山羊抗兔I g G 及F I T C 標(biāo)記的綿羊抗兔I g G 競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，用改裝的以光纖束連接微弱光測(cè)定儀的熒光顯微鏡測(cè)定熒光強(qiáng)度。在2 5 - 6 0 0 u g ／m l 的山羊抗兔I g G 濃度范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度與山羊抗兔I g O 濃度的濃度成反比關(guān)系。測(cè)得山羊抗兔I g G 的最低檢出限為2 5 g t g ／r n l 。4 ．2 抗體過(guò)剩法測(cè)定固定有兔I g G 的金膜與事先溫育過(guò)的兔I g G 與F I T

4、C標(biāo)記的綿羊抗兔I g G 的混合溶液作用，剩余的F I T C 標(biāo)記綿羊抗兔I g G 與固定的兔I g G 結(jié)合。在兔I g G 濃度2 5 ·5 0 0 ug ／r r d 內(nèi)，熒光強(qiáng)度與兔I g G 濃度的對(duì)數(shù)成反比關(guān)系：F I = 8 2 8 6 ．3 —2 8 7 9 ．9 } L o gC ，r 一0 ．9 9 2 6 ，F(xiàn) I 為熒光強(qiáng)度，C 為兔I g G 濃度。測(cè)得兔I g O 的最低檢出限為2 5 ug

5、／m l 。4 ．3 夾心法測(cè)定固定有山羊抗兔I g G 的金膜先與兔I g G 作用，清洗后再與F I T C 標(biāo)記的綿羊抗兔I g G 反應(yīng)，形成夾心法測(cè)定。在兔I g G 濃度為1 - 1 0 0ug ／m l 的范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度與兔l g G 濃度的對(duì)數(shù)成正比關(guān)系：F I = 1 4 1 6 ．6+ 2 6 7 7 ．9 } L o gC ，r = O ．9 9 6 0 ，F(xiàn) I 為熒光強(qiáng)度，C 為兔I g G 濃度。測(cè)得兔I