骨保護素基因修飾的自體骨髓基質細胞在Beagle犬牙周組織再生術中的作用.pdf

1、目的： 觀察骨保護素(OPG)基因修飾的骨髓基質細胞(BMSCs)復合PLGA材料移植對牙周骨缺損的修復作用。 方法： (1)4只成年Beagle犬，選其24顆前牙頸部齦緣水平結扎絲線并飼以高糖飲食，分別于1w、2w、4W、8w檢查實驗動物的牙周狀況，記錄結果。 (2)穿刺抽吸犬髂骨骨髓，貼壁篩選法獲取BMSCs，接種到PLGA材料上進行體外培養(yǎng)，并利用脂質體瞬時轉染重組質粒pSecTag2/B-OPG，

2、掃描電鏡觀察BMSCsopg-PLGA復合物。 (3)牙周病模型建成后行翻瓣檢查、修整近中牙槽骨缺損至3mm,共分3組：實驗組(缺損處植入OPG基因修飾的BMSCs復合PLGA)；陰性對照組(缺損處植入BMSCs復合PLGA)；空白對照組(常規(guī)牙周翻瓣治療)。 (4)牙周手術后第6周處死動物，進行臨床、X線片觀察，并制作切片行組織學觀察，測量新生牙槽骨和牙骨質的高度、新生結締組織的附著量。統(tǒng)計學分析相關數(shù)據(jù)。 結

3、果： (1)所有實驗用牙的牙周均形成近似人類臨床牙周病的實驗性牙周病，但嚴重程度不一。(2)掃描電鏡顯示BMSCsopgc與PLGA支架復合良好。(3)牙周手術后6周，術區(qū)傷口愈合良好，粘膜無紅腫及感染。(4)X片觀測：實驗組牙周組織缺損區(qū)牙槽骨高度高于兩對照組。(5)組織學觀察：實驗組可見大部分的牙周組織再生，較對照組有更多的新生牙槽骨，可見新生骨小梁，接近正常骨組織結構，支架材料已消失，未見根吸收等不良愈合方式。陰性對照組修

4、復了部分牙周組織缺損，可見少量牙槽骨，膠原纖維多見；空白對照組鮮見牙周組織修復，有纖維結締組織和長上皮細胞長入。實驗組組織學評分與兩對照組相比有統(tǒng)計學差異(P<0.01，P<0.01)。 結論： (1)OPG基因修飾的BMSCs在PLGA支架中生長良好，牙周手術后動物也無不良反應，說明PLGA適用于牙周組織工程； (2)動物實驗證明OPG基因治療與組織工程聯(lián)合能有效促進犬牙周骨缺損的骨組織再生； (3)O