TPA基因局部定位轉移預防靶器官血栓形成的實驗研究.pdf

1、第一部分TPA基因預防移植靜脈再狹窄的實驗研究 實驗一pcDNA3.1-Myc-HisB(-)/tPA基因新型 真核表達載體的構建和鑒定 目的:構建人組織型纖溶酶原激活因子(tPA)基因的新型真核表達載體，為血栓相關性疾病的基因治療奠定基礎。 結論:成功構建pcDNA3.1-Myc-HisB(-)/t-PA基因新型真核表達載體。 實驗二轉tPA基因內皮細胞纖溶活性的變化 目的:觀察轉染人組

2、織型纖溶酶原激活因子(tPA)基因的人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)纖溶酶活性變化。 結論:構建的pcDNA3.1-Myc-HisB(-)/tPA基因新型真核表達載體，能在HUVEC中表達，其表達具有高拷貝、穩(wěn)定性好的特點，獲得的表達蛋白活性較高，提示本載體和穩(wěn)定表達tPA基因的人臍靜脈內皮株能夠作為基因治療工具用于哺乳動物的實驗研究。 實驗三TPA基因體外轉染對血管平滑肌細胞增殖和遷移的影響 目的:探討tPA基因

3、體外轉染對鼠血管平滑肌細胞(VSMC)黏附、增殖和遷移的影響，為tPA基因在預防移植血管再狹窄中的應用奠定理論基礎。 結論:轉tPA基因血管平滑肌細胞纖溶活性增高，但對血管平滑肌細胞的黏附、增殖和遷移能力沒有影響。 實驗四局部轉染TPA基因對移植靜脈再狹窄的影響 目的:觀察組織型纖溶酶原激活因子(tPA)局部轉基因表達對移植靜脈血栓形成和內膜增生的影響并探討其機制。 結論:局部轉染tPA基因，能抑制移植靜

4、脈血栓形成，減輕新內膜的增殖，從而有效預防再狹窄的發(fā)生，其機制可能是通過抑制PDGF和TGF-β1的過度表達而實現的。 第二部分明膠涂層的Dacron滌綸片攜帶tPA基因局部定位轉移對兔左房血纖溶活性的影響 目的:探討tPA基因左心房局部定位轉移對兔左房血及外周血纖溶活性的影響。 結論:明膠蛋白涂層可作為一種有效的基因轉移方法；攜帶tPA基因的明膠涂層的Dacron片，植入兔左心耳，能在局部表達、分泌tPA蛋白，