Celecoxib干預(yù)胃癌發(fā)生發(fā)展的實驗研究.pdf

1、[目的] 該研究通過測定胃癌組織及癌旁組織中的COX-2(環(huán)氧化酶-2)的表達，及在celecoxib(COX-2抑制劑)的干預(yù)下，與胃癌發(fā)展密切相關(guān)的細胞增值及VEGF(血管內(nèi)皮生長因子)的表達，和裸鼠移植瘤模型實驗，以探討環(huán)氧化酶-2、環(huán)氧化酶-2抑制劑與胃癌的關(guān)系。 [方法] 1.采用SP免疫組織化學(xué)法檢測胃癌組織及癌旁組織(胃癌組織按有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，臨床病理分期即早期、進展期，組織病理分期即高中分化、低未

2、分化三種標(biāo)準(zhǔn)分類)中的COX-2表達。 2.采用細胞計數(shù)檢測celecoxib對胃癌細胞SGC7901和BGC823生長曲線的影響。胃癌細胞SGC7901和BGC-823常規(guī)培養(yǎng)于含10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基，按計劃每日取兩塊24孔板計數(shù)，共8天。以培養(yǎng)時間為橫軸，細胞數(shù)對數(shù)為縱軸，繪制各藥物濃度干預(yù)后的細胞生長曲線。 3.采用MTT比色法檢測celecoxib對SGC7901細胞和BGC-823存活率的影

3、響。胃癌細胞SGC7901和BGC-823常規(guī)培養(yǎng)于含10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基，對照組細胞存活率記為100％，實驗組按下列公式計算細胞存活率：細胞存活率=實驗組OD值/對照組OD值×100％。 4.ELISA(酶聯(lián)免疫吸附)法測定celecoxib對胃癌細胞SGC7901細胞和BGC823分泌釋放VEGF蛋白的影響。胃癌細胞SGC7901、BGC823常規(guī)培養(yǎng)于含10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)基，待細胞貼

4、壁后加藥。設(shè)劑量—效應(yīng)關(guān)系組和時間—效應(yīng)關(guān)系組。4天后結(jié)束實驗，提取細胞上清液。按ELISA試劑盒建立VEGF蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢測450nm處OD值，由曲線得出VEGF蛋白濃度。 5.Celecoxib干預(yù)下的裸鼠移植瘤實驗。SGC7901、BGC823細胞株復(fù)蘇傳代后取生長狀態(tài)良好的細胞于裸鼠腋下皮下接種。30d后處死裸鼠后稱瘤結(jié)節(jié)重量，抑瘤率的計算按公式抑瘤率(％)=(對照組平均瘤重量-實驗組平均瘤重量)/對照組平均瘤重量×1

5、00計算抑瘤率。 6.統(tǒng)計學(xué)處理采用x2檢驗和t檢驗。數(shù)據(jù)以x±s表示，P＜0.05表示統(tǒng)計學(xué)差異顯著，P＜0.01表示統(tǒng)計學(xué)差異非常顯著。 [結(jié)果] 1.胃癌組織(胃癌組織按有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，臨床病理分期即早期、進展期，組織病理分期即高中分化、低未分化三種標(biāo)準(zhǔn)分類)與癌旁組織中的COX-2表達存在顯著差異。 2.Celecoxib對胃癌細胞SGC7901、BGC823均有抑制作用，表現(xiàn)出劑量依賴性和時間依

6、賴性，對中分化的SGC7901細胞的抑制作用小于低分化的BGC823細胞。 3.Celecoxib對胃癌細胞SGC7901、BGC823分泌VEGF均有抑制作用，隨著藥物濃度的增加和作用時間的延長，其VEGF分泌量也相應(yīng)降低。 4.Celecoxib對兩種胃癌細胞系裸鼠動物模型的腫瘤生長均有不同程度的抑制，表現(xiàn)出劑量和時間依賴性，BGC823抑瘤率要高于SGC7901，但差異無顯著性(P＞0.1)。 [結(jié)論]