WT1基因及其異構(gòu)體在白血病中表達與臨床應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討慢性粒細胞白血病患者和急性白血病患者不同病程階段、不同亞型之間骨髓細胞中WT1的表達水平及其與臨床預后、監(jiān)測微小殘留病(MRD)的關(guān)系；尤其是白血病患者接受異基因骨髓移植后骨髓細胞中WT1的動態(tài)表達水平在監(jiān)測MRD中意義。同時探討不同白血病細胞株及不同亞型急性白血病患者中WT1(+17AA)/(-17AA)異構(gòu)體表達，以及WT1(+17AA)/(-17AA)異構(gòu)體表達的改變與NB4細胞誘導分化的關(guān)系。探討WT1肽特異性CTL對

2、白血病細胞體外靶向免疫治療作用。 方法:建立實時定量RT-PCR方法，采用LightCyclerPCR儀檢測了15例初診CML患者、108例不同病程階段AL患者、15例白血病患者allo-BMT前后(11l例次)和23例非白血病患者骨髓中WT1及內(nèi)參GAPDH的表達水平，以WT1N=(WT1拷貝數(shù)/GAPDH拷貝數(shù))×104計算WT1表達水平，詳細記錄所選患者的臨床資料。同時檢測NB4細胞誘導分化過程中WT1及WT1(+17AA

3、)異構(gòu)體動態(tài)變化，計算WT1N(+17AA)值，并用流式細胞儀檢測NB4細胞表面抗原CDllb的變化。采用MJPCR儀檢測K562、SHI、Jurkat、NB4、NB4/WT1A、NB4/WT1D等白血病細胞株及79例初診急性白血病患者骨髓中WT1基因和WT1(+17AA)異構(gòu)體表達水平，以ABL基因作為內(nèi)參，計算WT1(+17AA)/WT1比值。WT1、WT1(+17AA)異構(gòu)體及ABL基因引物及探針序列均由PrimerPriemer

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