TGF-β1誘導肺泡上皮細胞間質轉化對肺纖維化的意義研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:以TGF-β1誘導A549細胞出現上皮細胞-間質細胞轉化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),探討EMT過程的信號轉導途徑對肺纖維化發(fā)病機制的意義。
　　 方法:體外培養(yǎng)A549細胞,以TGF-β15ng/ml進行干預,收集不同時段的細胞,用熒光實時定量PCR檢測上皮及間質細胞標志物的mRNA在0h、1h、3h、6h、12h和24 h的表達水平,Westernblot檢測上皮及間質

2、細胞的標志物在0h、3h、6h、12h、24h、48h和72 h的表達水平,以及信號轉導蛋白P-Smad2/3、Snaill、Snai12在0h、24h、48h的表達水平,應用倒置相差顯微鏡觀察TGF-β1干預前后細胞形態(tài)學的變化,并在0h、24h、48h照相記錄。
　　 結果:TGF-β15ng/ml干預后,A549細胞上皮細胞標志物的mRNA和蛋白表達隨著時間延長總體下調(P<0.05),間質細胞標志物的mRNA和蛋白表達上

3、調(P<0.05)；信號轉導蛋白P-Smad2/3、Snaill上調(P<0.05),snail2弱表達(P>0.05)；倒置相差顯微鏡觀察到TGF-β1干預后A549細胞由鵝卵石狀變?yōu)樗笮?形態(tài)如同肌纖維母細胞。
　　 結論:TGF-β1可以在體外誘導肺泡上皮細胞向間質細胞轉化,其機制與Smad2/3、Snaill信號轉導途徑相關,提示肺泡上皮細胞向間質細胞的轉化是肺纖維化發(fā)生的直接因為,而Smad2/3、Snaill信號轉導

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