

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、第一部分大鼠腦星形膠質細胞體外培養(yǎng)與鑒定Cdk5在星形膠質細胞中的表達
目的:研究Cdk5在體外原代培養(yǎng)星形膠質細胞中的表達情況。
方法:取出生3天內SD大鼠皮層,減碎組織,0.125%胰酶消化,200M濾網過濾,800rpm4°8min離心,重懸細胞,置于37°細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)。采用GFAP免疫熒光鑒定星形膠質細胞純度,并通過免疫熒光染色觀察Cdk5在大鼠皮層星形膠質細胞中的表達情況。
結果:通過參考文獻培
2、養(yǎng)、純化、鑒定星形膠質細胞,采用GFAP免疫熒光鑒定星形膠質細胞純度達到95%以上。免疫熒光染色顯示Cdk5在星形膠質細胞中表達。
結論: Cdk5在皮層星形膠質細胞中表達豐富。
第二部分星形膠質細胞體外轉染Cdk5-siRNA后對細胞增殖、攝取Glu能力及分泌BDNF的影響
目的:通過星形膠質細胞體外轉染Cdk5-siRNA,觀察轉染后星形膠質細胞細胞周期、增殖、谷氨酸轉運體、谷氨酸攝取能力的變化情況。<
3、br> 方法:原代培養(yǎng)星形膠質細胞,傳代,純度鑒定>95%后給予體外轉染Cdk5-siRNA,利用懸浮轉染方法,以提高siRNA的轉染效率,轉染成功后,通過RT-PCR,Western blot篩選出最有效的Cdk5-siRNA序列,以用于后續(xù)的實驗。將實驗分為CN-siRNA,CN-siT3,OGD-siRNA,OGD-siT3實驗組,研究siRNA的轉染對細胞增殖、攝取Glu能力及分泌BDNF的影響
結果:通過星形膠質細
4、胞體外懸浮轉染Cdk5-siRNA后,篩選出第三個序列為沉默效率最高的序列;流式細胞術結果顯示體外轉染Cdk5-siRNA后,不論是正常條件還是糖氧剝奪的環(huán)境,星形膠質細胞進入細胞周期S期的比例增加;同時Edu結果表明,體外轉染Cdk5-siRNA后,促進星形膠質細胞增殖;星形膠質細胞谷氨酸轉運體Western blot結果顯示體外轉染Cdk5-siRNA后,轉染Cdk5-siT3組下調了谷氨酸轉運體的表達,星形膠質細胞谷氨酸攝取能力結
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 星形膠質細胞中CDK5磷酸化BAG3的作用與機制研究.pdf
- CDK5、EGR2在肝細胞癌中異常表達的研究.pdf
- Bystin在反應性星形膠質細胞中的表達及其功能研究.pdf
- 大鼠局灶性腦挫傷后Cdk5表達變化.pdf
- FEZ1在星形膠質細胞中的表達及其功能研究.pdf
- Cdk5蛋白在胃癌中的表達及其臨床意義.pdf
- 大鼠局灶腦缺血-再灌注后星形膠質細胞的反應及星形膠質細胞炎癥介質的表達.pdf
- 顳葉癲癇海馬區(qū)星形膠質細胞大麻素Ⅰ型受體的表達及功能研究.pdf
- 抑制Cdk5活性促進新生大鼠缺血缺氧損傷后功能恢復.pdf
- 單純皰疹病毒性腦炎認知功能障礙小鼠海馬組織CDK5的表達變化.pdf
- 新型Cdk5抑制劑的設計、合成及初步藥理活性研究.pdf
- cdk5過度表達對大鼠tau蛋白磷酸化及空間記憶的影響.pdf
- 慢病毒miRNA干擾小鼠星形膠質細胞補體調節(jié)蛋白CD59表達及功能的研究.pdf
- CDK抑制劑O1omoucine對星形膠質細胞增殖活化的影響.pdf
- 外源性線粒體對大鼠皮層星形膠質細胞活性及功能的影響.pdf
- 星形膠質細胞與神經元CDKI表達的差異研究.pdf
- Stathmin蛋白表達與腦星形膠質細胞瘤關系的研究.pdf
- 氨上調星形膠質細胞TRPC1基因的表達.pdf
- 異氟醚對老齡大鼠認知功能及星形膠質細胞GFAP表達的影響.pdf
- 氟西汀對星形膠質細胞中ΔFosB表達的影響.pdf
評論
0/150
提交評論