在缺氧微環(huán)境中姜黃素對PANC-1中HIF-1α和VEGF基因表達的影響.pdf

1、研究目的：
　　 觀察缺氧微環(huán)境中人胰腺癌細胞株PANC-1（體外培養(yǎng)）經(jīng)過姜黃素干預后HIF-1α和VEGF基因表達情況，深入研究姜黃素對體外胰腺癌細胞中HIF-1α和VEGF表達的抑制機制。
　　 研究方法：
　　 1．體外培養(yǎng)PANC-1，在缺氧微環(huán)境中利用各姜黃素劑量組(0μmol/L，0.1μmol/L，1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)干預PANC-1，作用24h后，倒置相差顯微鏡

2、觀察對照組和不同劑量的藥物組干預后PANC-1細胞的生長狀況。
　　 2．MTT法檢測對照組和不同劑量的藥物組(0μmol/L，0.1μmol/L，1μmol/mL、10μmol/L、100μmol/L)對PANC-1作用24h、48h、72h、96h后的細胞生存率，并以曲線圖直觀表示。
　　 3.RT-PCR檢測PANC-1在缺氧條件下姜黃素干預24h后HIF-1α和VEGF的mRNA表達情況。
　　 4．EL

3、ISA檢測缺氧及姜黃素作用于胰腺癌細胞24h后HIF-1α的蛋白表達情況。
　　 研究結果:
　　 1．倒置相差顯微鏡下觀察結果發(fā)現(xiàn)：缺氧微環(huán)境中姜黃素對PANC-1細胞作用24h后，各劑量組細胞數(shù)目與對照組相比無明顯減少，各劑量組之間比較，無明顯差異，細胞貼壁率在90％—95％之間。
　　 2．MTT法檢測結果表明：姜黃素對胰腺癌細胞株PANC-1細胞有抑制作用，在作用24h后，隨著姜黃素劑量的增加，抑制作用無

4、明顯差異，不同劑量組之間的細胞生存率在95％左右，隨時間的增加(48h、72h、96h)，抑制作用逐漸明顯。
　　 3．RT-PCR檢測結果表明：藥物組HIF-1α的mRNA表達水平與對照組相比，無明顯差異，實驗組間也無明顯變化，然而作用后藥物組VEGF的mRNA表達水平與對照組相比，有明顯抑制，組間可見顯著差異，具有明顯的劑量依賴性。
　　 4．ELISA法檢測結果表明：實驗組HIF-1α蛋白表達水平與對照組比較明顯降

5、低(F=138.43,P＜0.01)，且有明顯的劑量依賴性，隨著藥物劑量的增大而逐漸降低。
　　 研究結論：
　　 1．姜黃素可以抑制胰腺癌細胞株PANC-1生長增殖，但24h內(nèi)貼壁細胞的數(shù)量及形態(tài)無明顯變化，隨著藥物劑量、作用時間(48h，72h，96h)的增加，抑制作用逐漸明顯。
　　 2．姜黃素抑制HIF-1α蛋白的合成，不是依靠抑制胰腺癌細胞的增殖及誘導其凋亡程序，而是依賴作用于轉(zhuǎn)錄后機制影響表達的。