鵝細小病毒VP3-ELISA和NS2-ELISA檢測方法的建立及抗體消長規(guī)律的測定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本試驗通過原核表達載體pET-30a，成功構建了pET-30a-NS2重組質粒，通過大腸桿菌表達系統(tǒng)表達GPV-NS2蛋白；對表達GPV-VP3蛋白的陽性菌鑒定正確，通過Ni-NTA系統(tǒng)對兩種蛋白分別進行純化，以純化的NS2蛋白和VP3蛋白為檢測抗原建立兩種間接ELISA檢測方法，并對其進行優(yōu)化，確定最佳反應條件。我們應用建立的VP3-ELISA和NS2-ELISA兩種檢測方法分別對實驗免疫的鵝血清抗體進行檢測。結果表明VP3蛋白的抗體

2、在免疫后第五周達到最高峰，之后略有下降，可持續(xù)到第十四周。NS2蛋白的抗體在免疫后第四周達到最高峰，可持續(xù)到第十四周。比較這兩種蛋白的抗體消長規(guī)律可見，非結構蛋白NS2的抗體最高峰較結構蛋白VP3的早出現(xiàn)一周。通過與中和試驗比較，建立的VP3-ELISA檢測結果可以反映中和效價變化規(guī)律，有望代替中和試驗。 本研究建立了VP3-ELISA和NS2-ELISA檢測方法，并對鵝細小病毒免疫后的抗體尤其是非結構蛋白進行監(jiān)測，為鵝細小病毒

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