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文檔簡介
1、2刺參酸性粘多糖對誘發(fā)肝癌大鼠的免疫調節(jié)作用摘要目的:通過建立誘發(fā)性大鼠肝癌動物模型,考察刺參酸性粘多糖(SJAMP)在誘發(fā)大鼠肝腫瘤過程中的作用,并從免疫功能角度研究其對肝腫瘤發(fā)生的影響。方法:將50只wistar大鼠隨機分為正常對照組(A組)、模型組(B組)、SAJMP低劑量組(175mg/Kg,C組),SJAMP中劑量組(35mg/Kg,D組),SJAMP高劑量組(70mg/Kg,E組)。除正常對照組(A組)外,其余各組灌胃2%o
2、DEN生理鹽水溶液以誘發(fā)肝腫瘤,SJAMP干預組(C組、D組、E組)同時灌胃給予SJAMP,飼養(yǎng)期間每周至少稱重一次,直至第16周;第16周用水合氯醛腹腔麻醉大鼠,腹主動脈取血,檢測ALT、AST等肝功指標;無菌取脾、胸腺,立即稱重,計算脾指數(shù)和胸腺指數(shù);分別計數(shù)肝臟上有一條直徑大于3mm和5mm的瘤結節(jié),并測量最大瘤結節(jié)的長徑和短徑,計算抑瘤率;貼壁法分離純化M巾,用中性紅吞噬實驗檢測脾巨噬細胞吞噬功能;MTT法檢測脾巨噬細胞的殺傷功
3、能;MTT法檢測自然殺傷細胞活性:ELISA法檢測血清中TNF—a和IL一2的水平;流式細胞術分析大鼠外周血T淋巴細胞亞群。結果:①與正常對照組相比,誘癌實驗組大鼠體重增長較慢,至實驗第16周時,E組和B組大鼠體重有統(tǒng)計學差異(P005);②誘癌實驗組ALT、AST和GGT均升高(P005),其中模型組升高最為顯著,隨干預劑量增加,SJAMP干預組以上指標呈逐漸下降趨勢,且與模型組比較有統(tǒng)計學意義(P001);③模型組胸腺指數(shù)與正常組組
4、相比有所降低(P005),但脾指數(shù)有所升高(P005),與模型組相比,SJAMP干預組脾指數(shù)和胸腺指數(shù)明顯升高(PO05),并呈現(xiàn)出劑量一效應關系;④SJAMP可顯著抑制肝腫瘤的發(fā)生,減少癌結節(jié)的發(fā)生數(shù)量,SJAMP干預組大鼠大于3mm和大于5mm的結節(jié)數(shù)明顯少于模型組(P005);最大結節(jié)的平均體積明顯小于模型組(P001);⑤模型組和S2wP干預組巨噬細胞吞噬能力較正常對照組均增(P005),SJAMP干預組增加更為明顯,其中D組和
5、E組與C組相比較,有統(tǒng)計學意義(P001);⑥與正常對照組相比,模型組巨噬細胞的殺傷能力降低(PO01),SJAMP干預組巨噬細胞的殺傷能力較模型組增加(P001);⑦模型組自然殺傷細胞活性較正常對照組明顯降低(P001),SJAMP干預可以提高誘癌大鼠的自然殺傷細胞活性(PO05);⑧模型組和SJAMP干預組的血清TNF—a水平高于正常組(P001),提示誘癌各組大鼠均可能存在肝臟損傷,SJAMP干預組中D組和E組與模型組相比較,差別
6、均具有統(tǒng)計學意義(P001);⑨模型組大鼠血清IL2水平明顯降低于正常組(P001),SJAMP干預組的IL一2TheEffectofStichopusJaponicusAcidMucopolysaccharideontheDevelopmentandImmuneFunctionofHepatocellularCarcinomaRatInducedbyDiethylnitrosamineAbstractObjectiveThrought
7、heestablishmentofratlivercancermodel,theroleofStichopusjaponicusacidmucopolysaccharide(SJAMP)inthedevelopmentofhepatocellularcarcinomainducedbydiethylnitrosamine(DEN)wasexploredinratsandthepossibleimmunologicalmechanisms
8、wasdeterminedMethods50wistarratswererandomlydividedintofivegroups:normalcontrolgroup(groupA),modelgroup(groupB),SAJMPlowdosegroup(175mg/Kg,groupC),SJAMPmoderatedosegroup(35mg/Kg,groupD),SJAMPhighdosegroup(70mg/Kg,groupE)
9、byweightInadditiontonormalcontrolgroup,alltheratsweregivenorally2‰DE]Nsalinesolutiontothe16thweektoinducehepatocelluarcarcinomameanwhiletheywereintervenedwimdifferentdosesofSJAMPduringtheprocessofcarcinogenesisAlltherats
10、wereweighedonceaweekduringthebreeding,andattheendofthe16thweek,a11theratswereanaesthetizedbyusingchloralhydratebloodsamplesweredrewfromtheabdominalaorta;spleenandthymuswereexcisedundersterileconditionsandweighed,spleenin
11、dexandthymusindexwerecalculatedThenumberofthenodulesmorethan3ramor5mmindiameterwerecounted,inadditionthesizeofthelargestnodulewerecomparedamonggroupsThetumorinhibitoryrateWascalculatedMacrophagocytes(Mf)werepurifiedviaat
12、tachmentculture,macrophagephagocytosisWasobservedwithphagocytosingneutralredmethod;spleenmacrophagekillingcapabilityandNK(Naturalkiller)cellactivityweremeasuredbyMTTmethod,thelevelsofserumTNFaandIL2weredetectedwithenzyme
13、linkedimmunosorbantassay(ELISA);TlymphocytesubsetsinperipheralbloodwereanalyzedbyflowcytometryReSultsOComparedwithnormalcontrolgroup,theinducedhepaticcarcinomaratsgainweightsloweratthe16thweek,theweightsofratsofgroupEwas
14、obviouslyincreasedwhencomparedtomodelgroupB(PO05);②TheserumALTAST,andGGToftheinducedhepaticcarcinomarats,especiallyinmodelgroup,increasedsignificantlywhencomparedtothoseofthenormalcontrolgroup,withtheincreaseoftheSJAMPin
15、terventiondose,theaboveindicatorsdecreasedgraduallyandthereweresignificantdifferencescomparedwithmodelgroup;③Thethymusindexofmodelgroupdecreased(PO05),whilethespleenindexincreased(P005)whencomparedtonormalgroup;withtheim
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