神經(jīng)節(jié)苷脂對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷后Nogo-A表達影響的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   圍產(chǎn)期窒息所致的新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemicencephalopathy,HIE)致死率及遺留后遺癥的幾率非常高,它嚴重的威脅了新生兒的生存質(zhì)量。主要原因是:中樞神經(jīng)受損后再生能力缺失,僅用對癥治療不能緩解其癥狀,亦不能降低其遺留后遺癥的可能性。舊觀點認為中樞神經(jīng)受損后很難再生,而近期的研究表明:中樞神經(jīng)的內(nèi)環(huán)境中存在抑制神經(jīng)再生的因子,嚴重影響了中樞神經(jīng)的再生。根據(jù)目前國內(nèi)外研究,不難發(fā)

2、現(xiàn)其中比較常見的中樞神經(jīng)抑制因子有以下幾種:Nogo-A、髓磷脂相關(guān)糖蛋白(myelin-associatedglycoprotein,MAG)和少突膠質(zhì)細胞—髓磷脂糖蛋白(oligodendrocyte-myelinglycoprotein,OMgp),Nogo-A的英文全稱是Neuriteoutgrowthinhibitor-A,它是一種被人類基因RTN4編碼的蛋白,被認為是中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)突生長的特異性抑制劑。這幾種抑制因子共同抑

3、制了神經(jīng)細胞的再生,它們經(jīng)過相同的受體(Nogoreceptor,NgR)發(fā)揮作用,而Nogo-A在抑制受損神經(jīng)中樞的作用更為強烈。
   該動物實驗研究旨在更為深入地探討新生兒缺氧缺血性腦病的治療。應(yīng)用免疫組化方法、HE染色檢測新生大鼠大腦Nogo-A陽性細胞的數(shù)量以及觀察新生大鼠腦組織的病理情況;給予新生大鼠神經(jīng)節(jié)甘脂(GM1),嚴密觀察各個時間段、各組腦組織Nogo-A陽性細胞的數(shù)量及神經(jīng)細胞的生長情況,探討Nogo-A在

4、新生大鼠HIBD腦損傷中的作用,觀察GM1對大鼠Nogo-A抑制腦細胞再生作用的影響及它是否可以保護因缺氧缺血而導(dǎo)致受損傷的神經(jīng)細胞。
   方法:
   將90只7日齡新生大鼠隨機分為三組:對照組、HIBD組及GM1治療組。①對照組(n=30):僅游離左側(cè)頸總動脈,不結(jié)扎,不低氧,給予腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.25ml/kg。②HIBD組(生理鹽水組)(n=30):制備HIBD模型后即刻給予腹腔內(nèi)注射生理鹽水0.25ml/

5、kg。視分組情況連用3天,③GM1治療組(n=30):制備HIBD模型后即刻給予腹腔內(nèi)注射GM-120mg/kg/天,稀釋至0.5ml后腹腔內(nèi)注射。視分組情況連用3天。以上各組均在12h、24h、72h三時間點采集標本,每組10只。各組動物分別處理后于12h、24h、72h時使其斷頭致死。將腦組織標本浸泡在30%蔗糖、40g/L多聚甲醛溶液中,待3天后,用石蠟固定,切片,通過HE染色觀察各組新生大鼠腦組織病理情況;用免疫組化的方法觀察N

6、ogo-A陽性細胞數(shù)量。
   結(jié)果:
   通過免疫組化的方法觀察對照組3個時段的新生大鼠腦組織Nogo-A陽性細胞數(shù)均隨著日齡的增長而略有增加;HIBD組:Nogo-A陽性細胞在造模24時即明顯升高,至72小時仍呈略微升高的趨勢;GM1組:Nogo-A的陽性細胞數(shù)早期逐漸升高,至24h時數(shù)量最多,之后開始減少,應(yīng)用GM1后,缺氧缺血后Nogo-A的陽性細胞數(shù)量的增加較為延后。通過HE染色觀察:①12h時間點觀察:神經(jīng)

7、細胞出現(xiàn)水腫,局部神經(jīng)元出現(xiàn)核仁消失、核固縮現(xiàn)象②24h時間點觀察:神經(jīng)元水腫,數(shù)量有所減少,核仁消失,核固縮;神經(jīng)基質(zhì)水腫。③72h時間點觀察:大腦皮質(zhì)神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,正常結(jié)構(gòu)消失,星形膠質(zhì)細胞腫脹,出現(xiàn)腦實質(zhì)壞死,膠質(zhì)細胞增生。
   結(jié)論:
   Nogo-A在缺氧缺血性腦損傷后其陽性細胞數(shù)量顯著增高,抑制中樞神經(jīng)損傷后的再生,神經(jīng)節(jié)苷脂GM1在缺氧缺血性腦損傷后可部分抑制Nogo-A的表達,有穩(wěn)定細胞膜、減輕

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