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文檔簡介
1、目的:
通過建立慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激大鼠抑郁模型(Chronic unpredictable mildstress,CUMS),檢測大鼠出現(xiàn)的快感缺失,對新異環(huán)境的探索能力減少,行動能力減弱,體重減輕等一系列與抑郁相關(guān)的癥狀。繼而觀察海馬病變,探討應(yīng)激對神經(jīng)細胞的生長和存活的影響;同時檢測大鼠海馬內(nèi)血漿纖溶酶原(plasminogen)和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain-derived neurotrophic factor,
2、BDNF)的表達,探討plasminogen和BDNF與抑郁障礙的相關(guān)性,加深對抑郁障礙發(fā)病分子機制的認識,為抑郁障礙的診斷和治療提供新的思路。
方法:
1.建立CUMS大鼠抑郁模型,實驗組大鼠接受21天各種不同的隨機安排的應(yīng)激刺激,包括:冰水游泳、室溫游泳、夾尾、整夜光照、潮濕墊料。
2.通過糖水偏愛測驗,曠場試驗,體質(zhì)量測驗,檢測大鼠的抑郁樣表現(xiàn)。
3.取大鼠海馬組織。常規(guī)HE染色觀察海馬病變
3、。免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry, IHC)及蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)方法分析大鼠海馬組織plasminogen和BDNF蛋白表達情況。
結(jié)果:
1.糖水偏愛測驗
實驗處理前空白對照組(Control,Con)與抑郁障礙組(Stress,St)2h內(nèi)糖水消耗量無顯著差異(P>0.05)。實驗處理后,兩組糖水消耗量有顯著差異(P<0.01)。
2.體質(zhì)量
4、測驗
實驗處理前Con組與St組體質(zhì)量無顯著性差異(P>0.05),實驗處理后兩組體質(zhì)量較實驗處理前均有顯著升高(P<0.05)。Con組體質(zhì)量增長率顯著高于St組(P<0.05)。
3.曠場試驗
實驗處理前,Con組與St組在水平運動得分,垂直運動得分和停留時間等行為學(xué)評分方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。實驗處理后Con組行為學(xué)評分較實驗處理前無顯著差異(P>0.05),而St組的行為學(xué)評分顯著降低
5、(P<0.05)。并且Con組水平運動和垂直運動得分顯著低于St組,停留時間顯著高于St組(P<0.05)。
4.大鼠海馬切片病理結(jié)果
對照組神經(jīng)細胞排列密集,呈極性分布,細胞顆粒較大,形態(tài)飽滿,胞漿呈嗜堿性,個別椎體細胞萎縮。實驗組神經(jīng)細胞層數(shù)減少,細胞數(shù)目明顯減少,細胞核消失,胞漿空亮,并可見凋亡細胞。
5.免疫組織化學(xué)法半定量
plasminogen和BDNF在對照組和實驗組大鼠海馬區(qū)陽性表
6、達的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
6.蛋白質(zhì)印記法定量
plasminogen和BDNF在對照組和實驗組大鼠海馬區(qū)陽性表達的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。plasminogen與BDNF的變化呈明顯正相關(guān)(r=0.65,P<0.01),回歸分析表明它們之間都存在明顯的依存關(guān)系,r2=0.423,回歸方程為:(Y)BDNF=0.750Xplasminogen+0.201。
結(jié)論:
大鼠
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