K562細胞衍生微泡的microRNA表達譜及在白血病中的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:微泡(Microvesicles,MVs)是各種內(nèi)源性的細胞(包括正常細胞、炎癥細胞、腫瘤細胞)釋放的微顆粒分子。微泡曾經(jīng)被認為是沒有生物學(xué)活性的灰塵(dust)。近來研究顯示微泡由激活細胞或者凋亡細胞產(chǎn)生,,可以在不同類型的細胞之間轉(zhuǎn)運生物學(xué)信息。腫瘤細胞衍生的微泡含有miRNA,包含miRNA的微泡從細胞膜表面脫落釋放到胞外微環(huán)境中便于細胞間的相互交流。本研究目的是篩選白血病細胞衍生的微泡miRNA表達譜并分析其在白血病中的作

2、用。
  方法:我們篩選出了K562細胞衍生的微泡、健康志愿者外周血衍生的微泡以及K562細胞的miRNA表達譜。我們采用Agilent human miRNA(v12.0)芯片篩選出微泡和細胞miRNA表達譜,并對表達明顯異常的microRNA進行實時定量PCR驗證。對異常表達的miRNA進行靶基因預(yù)測,并進一步進行了GO分析、pathway分析和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)整合分析。
  結(jié)果:(1)我們的研究結(jié)果顯示白血病細胞衍生的微泡與

3、正常細胞衍生的微泡miRNA表達譜有明顯差異性,K562細胞衍生的微泡表達23個miRNA,其中16個表達下調(diào),7個表達上調(diào)。(2)K562細胞衍生的微泡與其母細胞的miRNA表達譜有差異:77個miRNA僅在K562微泡中表達,122個miRNA僅在K562細胞中表達,104個miRNA在K562微泡和細胞中共同表達。這些結(jié)果提示細胞將miRNA分選到微泡中的過程是一個選擇性的過程。(3)微泡釋放到白血病微環(huán)境在白血病中具有重要作用,

4、靶基因pathway分析顯示大多數(shù)在微泡中異常表達的miRNA參與了與白血病相關(guān)的信號通路,尤其是絲裂原蛋白激酶(MAPK)信號通路和p53信號通路。(4)進一步實行miRNA基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)整合分析發(fā)現(xiàn)miR-15a/b,miR-16,miR-17以及miR-30家族在MAPK信號通路的調(diào)控中中具有重要作用。(5)K562細胞為費城染色體陽性的慢性粒細胞性白血病細胞系,存在t(9;22)。我們進一步分析了異常表達的miRNA的染色體定位,

5、發(fā)現(xiàn)有8個miRNA(hsa-let-7a,hsa-let-7f,hsa-miR-126,hsa-miR-126*,hsa-miR-23b,hsa-miR-24,hsa-miR-27b和hsa-miR-7)定位于9號染色體,4個miRNA(hsa-let-7b,hsa-miR-1249,hsa-miR-130b和hsa-miR-185)定位于22號染色體,這些miRNA共表達于K562微泡和細胞。利用TargetScan5.1軟件,我們

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