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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景:隨著社會(huì)工業(yè)化和現(xiàn)代化的飛速發(fā)展,外傷造成斷肢(指)患者不斷增加。一部分患者由于全身多發(fā)傷病情不穩(wěn)定不能急診行再植手術(shù),待病情穩(wěn)定后,斷肢(指)往往因?yàn)楸4婕夹g(shù)不過(guò)關(guān)已經(jīng)壞死,失去再植機(jī)會(huì),這些患者往往喪失部分功能甚至生活自理能力,給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)。如果離斷的肢體能妥善的保存,待患者病情平穩(wěn)后,仍可行斷肢(指)的再植,將為這部分患者帶來(lái)福音。此外,臨床上有采用同種異體組織成功移植的報(bào)道,我們希望將這些斷肢(指)成功保
2、存,并建立肢體庫(kù),為肢體缺失的患者提供再植的機(jī)會(huì)。復(fù)合組織乃至整個(gè)肢體的保存一直是再生醫(yī)學(xué)及顯微外科領(lǐng)域的亟待解決的難題,主要表現(xiàn)在冷卻一復(fù)溫過(guò)程中冰晶的形成與聚集,而復(fù)溫過(guò)程中冰晶的再形成將對(duì)細(xì)胞造成致命的損傷;復(fù)合組織保存及移植能否成功血運(yùn)的建立是關(guān)鍵因素。本研究基于以上背景,擬采用3種復(fù)溫方法對(duì)低溫保存復(fù)合組織進(jìn)行解凍,通過(guò)觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞活性找出一種深低溫冷凍后復(fù)合組織解凍的最佳復(fù)溫方法,從而為復(fù)合組織的保存及移植提供一定的依據(jù)
3、。
目的:比較3種不同復(fù)溫方法對(duì)深低溫冷凍的復(fù)合組織中血管活性的影響,找出一種對(duì)復(fù)合組織中血管損傷最小的復(fù)溫方法。
方法:選用20只健康新西蘭大白兔隨機(jī)分成四組,切取雙側(cè)后肢,對(duì)照組為新鮮斷肢取血管,三個(gè)實(shí)驗(yàn)組肢體離斷后經(jīng)梯度降溫后置入液氮中保存7天。將肢體取出,分別采用37℃水浴復(fù)溫(A組)、空氣復(fù)溫(B組)、-20℃冰復(fù)溫(C組)方法進(jìn)行復(fù)溫。采用光鏡、免疫組化方法觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞活性,結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
4、。
結(jié)果:光鏡觀察,37℃水浴復(fù)溫組(A組)、空氣復(fù)溫組(B組)內(nèi)皮細(xì)胞大片脫落,平滑肌細(xì)胞變形;而C組內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞保存較好,更接近對(duì)照組;免疫組化檢測(cè)中,3種復(fù)溫方法血管內(nèi)皮中均可見(jiàn)VEGF呈斑片狀的弱表達(dá),-20℃冰復(fù)溫組(C組)VEGF的表達(dá)更接近對(duì)照組,高于37C水浴復(fù)溫組(A組)及空氣復(fù)溫組(B組)(P<0.05)。
結(jié)論:
1.復(fù)合組織經(jīng)梯度降溫復(fù)溫后血管內(nèi)皮活性不同程度損傷
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