星形膠質細胞FEZ1對帕金森病神經修復作用的研究.pdf

1、帕金森病(Parkinson’s disease, PD)是由于中腦黑質多巴胺能神經元的進行性缺失造成的以神經退行性病變?yōu)橹鞯闹袠猩窠浵到y(tǒng)疾病。成束和延伸蛋白-1(fasciculation and elongation proteinzeta-1，F(xiàn)EZ1)參與哺乳動物中樞神經系統(tǒng)發(fā)育及軸突成束與延伸，參與多巴胺能神經元發(fā)生分化和多巴胺釋放調節(jié)。FEZ1主要在腦內神經元中表達，而在體外培養(yǎng)的星形膠質細胞中也有表達。有文獻報道，治療中樞

2、神經系統(tǒng)疾病，可通過誘導人星形膠質細胞FEZ1表達水平增高，從而對神經細胞起到保護作用。本實驗研究FEZ1在PD大鼠模型中的表達情況及高表達FEZ1的2型星形膠質細胞移植后PD癥狀改善情況，進而探討星形膠質細胞FEZ1在PD神經修復中的作用。
　　目的：建立PD大鼠模型，研究FEZ1在多巴胺神經元受損后的大鼠腦內的表達變化及定位情況，探討它在PD發(fā)病機制與神經修復中的功能與意義。將2型星形膠質細胞移植入PD大鼠紋狀體，觀察細胞的動

3、態(tài)變化及其神經保護作用。
　　方法：采用立體定位注射6-OHDA于前腦內側束的方法建立大鼠PD模型，應用real-time PCR, Western blot檢測FEZ1在6-OHDA處理后不同時間點的表達變化，應用免疫熒光化學法觀察FEZ1在大腦紋狀體和黑質中的表達變化與細胞定位。應用立體定位注射方法將CM-DiI標記的2型星形膠質細胞移植入PD大鼠紋狀體，檢測植入細胞的遷移情況，對神經組織結構的修復及PD癥狀改善情況。

4、　　結果：(1)6-OHDA毀損后2周PD大鼠出現(xiàn)明顯的典型旋轉行為，Nissl染色及TH免疫熒光染色見 PD模型大鼠毀損側黑質致密部神經元數(shù)量銳減。(2) real-time PCR結果顯示，F(xiàn)EZ1的mRNA水平在6-OHDA處理后的大鼠紋狀體和黑質中表達逐漸增加，達到最高峰，之后逐漸下降；Western blot結果顯示FEZ1蛋白水平變化與mRNA水平變化趨勢相似；GFAP蛋白表達變化與FEZ1蛋白表達變化也有相似的趨勢。(3)

5、免疫熒光化學結果發(fā)現(xiàn)，正常大鼠中FEZ1主要表達在神經元，星形膠質細胞中幾乎不表達，而毀損后FEZ1主要大量存在于星形膠質細胞中。(4)2型星形膠質細胞移植入PD大鼠，細胞可以在植入部位存活，大鼠旋轉行為得到改善，植入的細胞遷移至黑質和注射部位之外的紋狀體其它區(qū)域，黑質中TH, FEZ1表達量增加。
　　結論：FEZ1在PD大鼠模型中的表達變化提示，F(xiàn)EZ1在帕金森病發(fā)生發(fā)展過程中可能起到調節(jié)多巴胺釋放、保護神經元及延緩病情惡化的