紫杉醇體外誘導HL-60細胞凋亡及其分子機制的研究.pdf

1、紫杉醇(paclitaxel)是一種高效細胞毒藥物，通過誘導腫瘤細胞凋亡(apoptosis)而發(fā)揮抗腫瘤的細胞毒效應，它的作用靶點是細胞骨架的微管系統(tǒng)，影響微管聚合與解聚的動態(tài)平衡，抑制微管蛋白解聚，腫瘤細胞不能分裂變大，并出現多核細胞，阻斷細胞的有絲分裂，細胞停止在G0期和G2/M期，進而引起細胞的死亡。紫杉醇誘導腫瘤細胞凋亡的因素較多，具體通過哪條細胞凋亡途徑和與哪些基因相關，仍沒有一個清晰系統(tǒng)的解釋。目前的研究表明紫杉醇誘導腫瘤

2、細胞凋亡的機制與腫瘤的組織來源、細胞分型、藥物濃度等不同而有很大的差異。紫杉醇誘導細胞凋亡的機制已成為抗腫瘤治療的研究熱點之一。 紫杉醇現在廣泛的應用于乳腺癌、卵巢癌、膽囊癌、食道癌、非小細胞肺癌、胃癌、膀朧癌、白血病及骨肉瘤的治療等。由于紫杉醇長期應用表現出明顯的骨髓抑制，限制了紫杉醇作用于白血病的臨床研究，所以國內外對紫杉醇在白血病臨床方面的研究較少。目前國內外在該方向的研究主要集中于體外的實驗研究，不同分型的白血病細胞株對

3、紫杉醇應答途徑不盡相同。 本實驗研究紫杉醇對HL-60的生長抑制及誘導凋亡作用，及Bcl-2基因家族參與其誘導細胞凋亡作用的分子機制，為臨床應用紫杉醇治療白血病，提高白血病對紫杉醇的藥物敏感性提供實驗依據。將不同濃度的紫杉醇作用于人早幼粒白血病細胞HL-60，光學顯微鏡觀察細胞形態(tài)學改變、流式細胞儀分析檢測細胞凋亡比率、DNA凝膠電泳檢測DNA片段化、RT-PCR及蛋白免疫印跡方法檢測Bcl-2家族蛋白的改變。 結果：

4、 1)紫杉醇體外可直接作用于HL-60細胞，誘導其的發(fā)生細胞凋亡，呈明顯的劑量依賴性。 2)10-7mol/L紫杉醇作用HL-60細胞24h，DNA表現出明顯的片段化，即可誘導明顯的晚期細胞凋亡。 3)不同濃度的紫杉醇作用HL-60細胞后，Bad表達明顯上調；Bcl-2表達明顯下調。Bax基因和Bcl-xl基因有表達但無明顯變化。說明Bcl-2家族蛋白參與了紫杉醇誘導HL-60細胞發(fā)生細胞凋亡。 以上結果說