殼聚糖誘導煙草抗病機理研究.pdf

1、1.以9種植物病原真菌為試驗材料，利用PDA為培養(yǎng)基，研究了離體條件下不同濃度的殼聚糖處理對植物病原真菌的抑制活性和抑菌作用的持效時間。結果表明，殼聚糖對9種植物病原真菌的菌落形態(tài)、菌絲生長和繁殖等均有一定的影響。當殼聚糖濃度≥2.0g/L時，除葡萄炭疽病菌(Colletotrichumgloeospotioides)外，其他8種植物病原真菌的生長都受到了顯著抑制(p＜0.05)；在0.75g/L～5.0g/L的濃度范圍內，濃度越高抑菌

2、效果越明顯，但抑菌強弱與濃度不成正比；而濃度≤0.75g/L時對葡萄炭疽病菌的生長具有促進作用。高濃度殼聚糖抑菌持效期長，抑菌率下降慢。9種真菌的最低抑菌濃度(minimuminhibitoryconcentration，MIC)從3.0g/L到≥5.0g/L。殼聚糖對植物病原真菌抑制活性受濃度、時間和病原真菌種類等因素影響。 2.煙草黑脛病菌(Phytophthoraparasiticavarnicotianae，Ppn)是嚴

3、重危害煙草生產的一種致病真菌，試驗中以Ppn為材料，探討了4種不同分子量的殼聚糖在不同濃度和pH時對Ppn的菌落、菌絲的形態(tài)結構和菌絲生長的影響，以及對孢子萌發(fā)的抑制作用。在殼聚糖處理后Ppn菌絲出現畸變，正常的新陳代謝和細胞壁結構受到明顯影響和破壞。在低濃度下(≤0.625mg/L)，殼聚糖抑菌效果隨分子量增大而增強；分子量越小受濃度影響越大，濃度≥5.0mg/L時，分子量為4.7×104的殼聚糖抑菌效果最強。除分子量為5.0×103

4、的殼聚糖外，其它分子量較大的殼聚糖受pH影響明顯。殼聚糖分子量不同，其抑菌主要機理可能也不同，濃度、pH和分子量是殼聚糖抑菌活性的重要影響因素。 3.配制四種殼聚糖溶液，直接噴灑到對煙草黑脛病易感和具有抗性的兩種煙草的葉片上，觀測其對煙草葉片中POD、PAL兩種抗病相關酶的活性的誘導，同時作了POD的同工酶分析。殼聚糖誘導后兩種煙草的POD、PAL在96h內均出現酶活性高峰。出現時間和強弱在兩種煙草中不同，抗病性的中煙100活性

5、較高。同工酶電泳也發(fā)現4條同工酶帶染色均加深，但并沒又發(fā)現新的酶帶和不同品種的特征性酶帶。同時，病菌Ppn感染也激發(fā)了煙草葉片中兩種酶活性的升高，但都只有一個酶活性峰。殼聚糖能夠誘導煙草抗病能力的升高，誘導強度與濃度、分子量有關，整體上CS1誘導效應產生更快一些。 4.采用SDS電泳和紅外光譜分析了殼聚糖對Ppn和兩種煙草可溶性蛋白和化合物合成的影響?？傮w上，殼聚糖抑制Ppn中蛋白的合成，而對煙草的蛋白具有激發(fā)活性，但沒有發(fā)現蛋

6、白帶的缺失或增加。紅外光譜分析發(fā)現光譜吸收峰與殼聚糖分子量有關，接菌處理也能促使部分峰的升高，但與殼聚糖處理有差別。沒有蛋白帶和光譜吸收峰的出現或消失，主要是量的增加或減少，說明殼聚糖誘導煙草抗病和抑制Ppn生長是系統(tǒng)性的復雜反應。 5.直接將殼聚糖噴灑到煙草上，測定相對電導率和煙草病情指數變化。殼聚糖能夠降低煙草葉片的相對電導率，增強煙草的抗逆能力。能夠誘導煙草抗病能力的提高，對紅花大金元和中煙100誘導防效分別在72h、48