白芷抗癌活性成分研究.pdf

1、近年來(lái),以一些與腫瘤細(xì)胞分化增殖相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)鍵酶為藥物篩選靶點(diǎn),發(fā)現(xiàn)作用于特定靶位的高效、低毒、特異性強(qiáng)的新型藥物已成為當(dāng)今抗腫瘤藥物研發(fā)的重要方向。Shp2(Src homology2 domain containing proteintyrosine phosphatase-2)是第一個(gè)確定的具有磷酸酶活性的促腫瘤蛋白,而Shp2抑制劑的發(fā)現(xiàn)對(duì)的新型抗癌藥物的開(kāi)發(fā)具有重要意義。中草藥在中國(guó)已有幾千年的藥用歷史,其成分多樣性

2、和結(jié)構(gòu)復(fù)雜性的優(yōu)勢(shì)一直受到藥物開(kāi)發(fā)者的青睞。我們用Shp2抑制劑的高通量模型篩選了來(lái)源于植物庫(kù)中的2000多個(gè)餾分,發(fā)現(xiàn)白芷60％7,醇提取物的乙酸乙酯萃取部分具有特異性抑制Shp2活性的作用。通過(guò)綜合運(yùn)用硅膠柱色譜、ODS柱色譜、凝膠柱色譜、分析型與制備HPLC及重結(jié)晶等方法,對(duì)此活性部位進(jìn)行了系統(tǒng)的分離,得到34個(gè)單體化合物。通過(guò)NMR、質(zhì)譜、熔點(diǎn)及理化性質(zhì)等手段對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定,其中,1個(gè)為新化合物,15個(gè)為白芷中首次分離

3、。
　　 通過(guò)Shp2抑制劑高通量篩選模型對(duì)所有化合物進(jìn)行了篩選,發(fā)現(xiàn)化合物4、7、9、24、30和32六個(gè)化合物對(duì)PTP-Shp2具有特異性抑制作用,其IC50為17.2-64.1μM。為了進(jìn)一步研究Shp2抑制劑能否促進(jìn)細(xì)胞凋亡及抑制細(xì)胞生長(zhǎng),我們檢測(cè)了HepG2細(xì)胞中PARP的表達(dá),caspase的活性,及化合物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。結(jié)果顯示,化合物9(二十三碳二烯酸)和13(別歐前胡素)對(duì)HepG2細(xì)胞具有明顯生長(zhǎng)抑制作