Apobec-1重組腺病毒治療腎性高脂血癥的實驗研究.pdf

1、摘要1:
　　研究目的:
　　觀察單側腎切除阿霉素腎病兔ApoB mRNA編輯效率及其血、尿液生化和腎臟病理學改變。
　　研究資料與方法:
　　40只雄性6月齡新西蘭兔,體重1000±100g,隨機分為病例組(n=20只)、假手術組(n=20只)。①病例組:以3％的戊巴比妥30mg/Kg行腹腔注射麻醉,無菌條件下行左腎切除,1w后耳靜脈注射阿霉素5mg/Kg,術后12周處死所有兔子留取腎臟及肝臟標本,濾紙吸干后稱

2、重,立即用10%中性福爾馬林溶液固定,石蠟包埋;②假手術組:以3%的戊巴比妥30mg/Kg行腹腔注射麻醉,只探及腎包膜不切除左腎,1w后耳靜脈注射生理鹽水5mg/Kg,術后12周處死所有兔子留取腎臟標本,濾紙吸干后稱重,立即用10%中性福爾馬林溶液固定,石蠟包埋。另分別于試驗前(0周)和試驗結束(12周)檢測血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、總蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、24 h尿蛋白(24 h UPr)及載脂蛋白B-100、載

3、脂蛋白B-48。酶法測定Scr、BUN、TP、Alb;放射免疫法檢測血漿ApoB-100、ApoB-48;雙縮脲比色法檢測24小時尿蛋白濃度;蘇木素一伊紅(HE)染色觀察腎臟病理改變;免疫組化觀測肝臟ApoB-100及ApoB-48的組織表達。
　　研究結果:
　?、俨±M24 h UPr和血清Scr、BUN、ApoB-100和ApoB-48顯著高于假手術組,而血清TP,Alb則明顯降低。
　　②病例組腎臟腎臟腎上皮細

4、胞腫脹,系膜細胞增生、系膜基質增多;腎間質增寬,可見大量炎癥細胞浸潤。ApoB-100和ApoB-48以腎小球表達增高為主。研究結論
　　單側腎切除加1周后耳靜脈注射阿霉素(5 mg/kg)在術后12周可以成功建立腎病模型,具體表現(xiàn)為大量蛋白尿、低蛋白血癥和明顯的高脂血癥,腎臟病理顯示局灶性病變及肝臟組織ApoB-100和ApoB-48表達普遍增高。
　　摘要2:
　　研究目的:
　　觀察外源性Apobec-1基

5、因導入新西蘭兔體內后,肝臟apoB mRNA編輯效率及其對血脂代謝的影響。
　　研究資料與方法
　　60只雄性6月齡新西蘭兔,體重1000±100g,隨機分為apobec-1腺病毒感染病例組(n=20)、假干預組(n=20),假手術組(n=20),置于代謝籠中飼養(yǎng)。①病例組:以3%的戊巴比妥30mg/Kg行腹腔注射麻醉,無菌條件下行左腎切除,1w后耳靜脈注射阿霉素5mg/Kg,術后11周處死每組的半數(shù)兔子留取肝臟標本,其余兔

6、子分別通過耳緣靜脈注入Apobec-1重組腺病毒,飼養(yǎng)1周,摘除右側腎臟和肝臟,濾紙吸干后稱重,立即用10%中性福爾馬林溶液固定,石蠟包埋;②假干預組:以3%的戊巴比妥30mg/Kg行腹腔注射麻醉,無菌條件下行左腎切除,1w后耳靜脈注射阿霉素5mg/Kg,術后11周處死每組的半數(shù)兔子留取肝臟標本,其余兔子分別通過耳緣靜脈注入空白腺病毒,飼養(yǎng)1周,摘除右側腎臟和肝臟,濾紙吸干后稱重,立即用10%中性福爾馬林溶液固定,石蠟包埋;③假手術組:

7、以3%的戊巴比妥30mg/Kg行腹腔注射麻醉,只探及腎包膜不切除左腎,1w后耳靜脈注射生理鹽水5mg/Kg,術后11周處死每組的半數(shù)兔子留取肝臟標本,其余兔子分別通過耳緣靜脈注入Apobec-1重組腺病毒,飼養(yǎng)1周,摘除右側腎臟和肝臟,濾紙吸干后稱重,立即用10%中性福爾馬林溶液固定,石蠟包埋。分別留取處死前后靜脈血及24h尿液。
　　研究結果:
　　①用藥前病例組24 h UPr、ApoB-100和ApoB-48、TG及T

8、CH、VLDL、LDL-C顯著高于假手術組,而與假干預組相差不大,而用藥后24小時病例組尿蛋白較前有所緩解,ApoB-100、TG及TCH、VLDL、LDL-C顯著下降,TP明顯升高,ApoB-48上升不明顯,假干預組及假手術組用藥后改變與用藥前差別不大。
　?、趯胫亟M腺病毒前后肝臟病理未發(fā)現(xiàn)有畸形改變;
　?、踂estern Blot均顯示病例組肝臟組織顯著表達Apobec-1和ApoB-48。
　　研究結論: