雙孔鉀通道TASK-1在缺氧性肺血管收縮中的作用及機制研究.pdf

1、目的：⑴觀察雙孔鉀通道TASK-1在缺氧所致肺動脈血管環(huán)張力改變中的作用。⑵探討雙孔鉀離子通道TASK-1介導缺氧性肺動脈收縮可能的機制。
　　方法：從胸心外科手術室獲得肺腫瘤患者切除的肺組織，然后分離三、四級肺動脈分支,制成肺動脈環(huán)，采用RM-6000多導生理記錄儀，觀察經c-Src抑制劑PP2、PP2類似物PP3、酪氨酸磷酸酯酶抑制劑bpv預處理后，對缺氧所致血管環(huán)張力改變的影響及TASK-1抑制劑A-293預孵育（100μM

2、）后PP2對缺氧所致動脈環(huán)張力改變的影響。經組織塊培養(yǎng)法獲取原代培養(yǎng)人肺動脈平滑肌細胞（human pulmonary artery smooth muscle cells，hPASMCs），經間接免疫熒光染色方法鑒定。第3至第6代用于膜片鉗實驗，觀察缺氧、A-293、PP2、PP3、bpv預處理后對TASK-1電流的影響。
　　結果：①在適宜前負荷下，肺動脈應用TASK-1抑制劑A-293后，A-293抑制肺動脈缺氧性收縮反應，

3、血管張力從1382±263mg降至1138±219 mg，p<0.05。②在適宜前負荷下，肺動脈應用c-Src抑制劑 PP2、PP3、bpv后，c-Src抑制劑 PP2抑制肺動脈缺氧性收縮反應，血管張力分從1379±231mg降至1103±215mg，p<0.05；PP3對肺動脈缺氧性收縮反應無影響，血管張力從1403±203mg降至1381±198mg，P>0.05；酪氨酸磷酸酯酶抑制劑bpV增強肺動脈缺氧性收縮反應，血管張力從135

4、1±213mg升至1632±253mg，p<0.05。③在適宜前負荷下，肺動脈應用A-293預孵育后加入PP2，PP2對肺動脈缺氧性收縮反應無影響，血管環(huán)張力1412±264mg至1356±243mg，P>0.05。④缺氧可逆性明顯抑制肺動脈平滑肌細胞TASK-1電流（電流密度從0.57±0.06 pA/pF至0.27±0.04 pA/pF，p<0.01），而TASK-1抑制劑A-293可阻斷該抑制效應。⑤c-Src特異性抑制劑PP2預

5、處理后，肺動脈平滑肌細胞缺氧敏感性 TASK-1電流消失（電流密度從0.28±0.04 pA/pF至0.26±0.05 pA/pF,P>0.05）；但是 PP2類似物 PP3預處理后，缺氧仍然可逆性抑制肺動脈平滑肌細胞TASK-1（電流密度從0.58±0.04 pA/pF至0.25±0.06 pA/pF，p<0.01）。此外，酪氨酸磷酸酯酶抑制劑bpv預處理后，肺動脈平滑肌細胞TASK-1電流明顯增加（電流密度從0.57±0.06 pA

6、/pF至0.74±0.07 pA/pF, p<0.01），缺氧可明顯抑制該電流（電流密度從0.74±0.07 pA/pF至0.26±0.05 pA/pF, p<0.01）
　　結論:⑴雙孔鉀通道TASK-1參與人肺血管缺氧性收縮反應。⑵雙孔鉀通道TASK-1介導人肺血管缺氧性收縮反應的過程具c-Src依賴性。⑶缺氧可逆性抑制肺動脈平滑肌細胞TASK-1電流。⑷酪氨酸激酶c-Src可調控雙孔鉀通道TASK-1。⑸雙孔鉀通道TASK-