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1、目的:觀察單層培養(yǎng)的成骨樣細(xì)胞加載不同持續(xù)靜壓力后,細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,探討不同靜壓力對(duì)成骨樣細(xì)胞整合素a5、B1mRNA表達(dá)的影響。 方法:1.復(fù)蘇MG-63細(xì)胞株,對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)傳代。2.把細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿中,分為對(duì)照組和壓力組,對(duì)照組不加力,壓力組細(xì)胞又分為15kpa、30kpa、45kpa三個(gè)力值組,每個(gè)力值組共有15個(gè)樣本,每次取3個(gè)樣本進(jìn)行加壓,分別加壓1hr、4hr、8hr、12hr、24 hr。加壓完成后收集細(xì)胞,用R
2、T-PCR檢測(cè)整合素a5、B1mRNA表達(dá)變化。 結(jié)果:1.在自制加壓裝置內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞后,細(xì)胞的形態(tài)學(xué)未見(jiàn)到明顯改變。2.加力15kpa、30kpa時(shí)成骨樣細(xì)胞整合素a5、B1 mRNA表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加,與陰性對(duì)照組和45kpa組有顯著性差異,30kpa組24hr表達(dá)量最高,45kpa組加力1hr、4hr后整合素a5、B1mRNA表達(dá)增加,隨加力時(shí)間延長(zhǎng)而表達(dá)下降。 結(jié)論:1.自制加壓裝置能夠?qū)?xì)胞進(jìn)行持續(xù)靜壓力實(shí)驗(yàn)。
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