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文檔簡介
1、目的:N-甲基(酰)-D-門冬氨酸(NMDA)受體是谷氨酸類門控通道,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的突觸傳遞調(diào)節(jié)方面起關(guān)鍵作用,廣泛存在于哺乳動物小腦皮質(zhì)顆粒細胞、平行纖維、高爾基細胞以及分子層中間神經(jīng)元的細胞膜上,但哺乳動物出生2周后小腦浦肯野細胞上的功能性NMDA受體的表達就會消失。迄今,NMDA受體在活體動物上、在完整小腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中的作用還不完全清楚。因此,本課題應(yīng)用電生理和藥理學(xué)等手段,研究外源性NMDA對烏拉坦麻醉小鼠小腦浦肯野細胞(Pur
2、kinje cell,PC)自發(fā)性活動的影響,探索NMDA對小腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)活動的影響及其機制。
材料與方法:ICR小鼠(6-8周齡)經(jīng)腹腔注射烏拉坦(1.3g/kg體重.)麻醉后,在小腦Vermis VIa/VIb相應(yīng)部位行直徑為1-1.5mm的開顱術(shù),除去硬腦膜,腦表面暴露部位持續(xù)灌流人工腦脊液(ACSF);與電生理記錄同步;電生理記錄選用細胞外記錄,電生理實驗數(shù)據(jù)分析采用Clampfit10.1軟件,采用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)
3、統(tǒng)計學(xué)分析,給藥前后均數(shù)的比較采用配對T檢驗,P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)差異。
結(jié)果:
?。?)腦表面灌流NMDA對小腦皮層 PC自發(fā)性單純性放電(simple spike,SS)活動產(chǎn)生可逆性的抑制作用,其抑制效應(yīng)具有劑量依存性,半數(shù)抑制濃度為50.3μM。
?。?)NMDA腦表面灌流濃度為25μM時可引起顯著抑制,給藥10分鐘后PC自發(fā)性SS放電頻率降低8.9±2.3%,沖洗后恢復(fù)。
?。?)當(dāng)NMD
4、A的濃度增加至50μM,PC自發(fā)性SS放電頻率可減少53.3±3.5%;但對自發(fā)性SS放電的幅值和寬度沒有顯著性影響。
?。?)高濃度NMDA可導(dǎo)致PC自發(fā)性SS放電停止,雖然對自發(fā)性復(fù)雜性放電頻率沒有顯著性影響,但可以顯著增加復(fù)雜性放電強度。
?。?)GABAA受體阻斷劑不僅可以解除NMDA對PC自發(fā)性SS放電的抑制作用,而且揭示了外源性NMDA可以間接興奮PC,增加自發(fā)性SS放電頻率。
結(jié)論:外源性NMDA
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