Caveolin-1促進糖尿病大鼠下肢缺血部位血管生成的作用及機制.pdf

1、目的：
　　建立糖尿病大鼠下肢缺血動物模型，采用尾靜脈注射轉(zhuǎn)染小凹蛋白（Caveolin-1）質(zhì)粒，觀察其缺血肌肉組織中血管生成情況，研究Caveolin-1在糖尿病大鼠下肢缺血部位中對血管生成的作用以及與AKT信號通路的關(guān)系。
　　方法：
　　從南華大學(xué)動物實驗部購買健康、雄性、SD大鼠，腹腔注射鏈脲菌素（STZ）構(gòu)建糖尿病大鼠模型，離斷左側(cè)股動脈及其分支建立急性下肢缺血動物模型，根據(jù)實驗設(shè)計隨機分為3組（每組10只

2、）：①假手術(shù)組、②缺血組、③糖尿病組，于缺血術(shù)后第14天收集各組缺血下肢的腓腸肌肌肉組織，用 Western-Blot測定Caveolin-1的表達情況；同樣根據(jù)實驗設(shè)計，運用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染Caveolin-1質(zhì)粒技術(shù)，隨機分為4組（每組20只）：①假手術(shù)組、②缺血組、③轉(zhuǎn)染組、④空轉(zhuǎn)染組，于缺血術(shù)后第14天取各組10只缺血下肢的腓腸肌肌肉組織，用Western-Blot檢測Caveolin-1、AKT的表達情況，其余大鼠于術(shù)后第28天取缺

3、血下肢腓腸肌肉組織行CD34免疫組織化學(xué)染色和HE染色，評價血管密度。
　　結(jié)果：
　　用Western-Blot檢測各組Caveolin-1蛋白的表達情況顯示：缺血組和糖尿病組Caveolin-1蛋白的表達較假手術(shù)組明顯增多（P＜0.05），而糖尿病組 Caveolin-1蛋白的表達較缺血組明顯低（P＜0.05）；轉(zhuǎn)染組比假手術(shù)組、缺血組、空轉(zhuǎn)染組的Caveolin-1、AKT蛋白的表達明顯增多（P＜0.05），表明轉(zhuǎn)染成

4、功。同時通過 HE染色以及CD34免疫組織化學(xué)染色分別觀察腓腸肌肌肉組織中微血管／肌纖維束的比值和微血管密度（MVD）時顯示：缺血組、空轉(zhuǎn)染組與假手術(shù)組比較時，微血管均有增多，但不如轉(zhuǎn)染組中微血管密度增加顯著（P＜0.05），這說明Caveolin-1過表達后對糖尿病大鼠下肢缺血部位的血管生成有明顯的促進作用，同時提示這可能與激活A(yù)KT有關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1、Caveolin-1過表達對糖尿病大鼠下肢缺血部位的血管生成有