切應(yīng)力影響megalin-cubilin表達(dá)變化及對DN腎小管間質(zhì)病變作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病的重要并發(fā)癥，己成為終末期腎病(ESRD)的主要原因，嚴(yán)重影響糖尿病患者的生活質(zhì)量和生存時(shí)間。 近年來研究表明，DN腎小管間質(zhì)損傷就發(fā)病時(shí)間和機(jī)制而言均有其獨(dú)立的一面。DN早期血流動(dòng)力學(xué)的變化，增加了對腎近端小管的切應(yīng)力作用，影響其結(jié)構(gòu)和功能．Megalin、cubilin是定位于腎近端小管起主要重吸收作用的糖蛋白，其表達(dá)變化可影響對白蛋白等多種成分的重吸收。

2、 目的：通過研究STZDN大鼠腎臟及切應(yīng)力作用下體外培養(yǎng)的腎近端小管上皮細(xì)胞中megalin、cubilin表達(dá)變化，探討DN早期影響腎小管功能障礙的機(jī)制，為臨床防治微量白蛋白尿和DN進(jìn)展提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和新的思路。 方法： 1.STZ腹腔注射SD雄性大鼠，DN造模成功后，隨機(jī)分為DN組和DN治療組(厄貝沙坦50mg／kg／d)，以正常SD雄性大鼠為對照，于2、4、6周分別取各組鼠的尿液、血液和腎臟標(biāo)本，檢測24小時(shí)尿

3、蛋白量、血肌酐和尿素氮、體重及腎重，應(yīng)用免疫組化及RT-PCR法檢測各組腎臟megalin、cubilin的表達(dá)。 2.將體外培養(yǎng)的腎近端小管上皮細(xì)胞(NRK-52E)分為空白對照組、甘露醇組、高糖組、厄貝沙坦和高糖加厄貝沙坦組，以5dy／cm<'2>和10dy／cm<'2>的切應(yīng)力分別作用各組細(xì)胞l、3、6h，以未受切應(yīng)力處理的各組細(xì)胞為對照，RT-PCR法檢測各組megalin、cubilin的表達(dá)，免疫熒光檢測各組細(xì)胞骨架

4、蛋白的表達(dá)。 結(jié)果： 1.體內(nèi)研究：(1)對照組。megalin、cubilin表達(dá)水平最高。DN組隨時(shí)間延長megalin、cubilin表達(dá)逐漸降低。DN治療組megalin、cubilin表達(dá)高于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)DN組。(p<0.05)(2)隨時(shí)間延長，DN組24小時(shí)尿蛋白定量、血清肌酐和尿素氮、腎臟肥大指數(shù)增加。DN治療組各指標(biāo)低于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的DN組。(p<0.05)(3)大鼠腎臟megalin、cubilin表達(dá)變化

5、與大鼠24小時(shí)尿白蛋白量呈負(fù)相關(guān)。(p