卡介苗對哮喘小鼠肺組織中PPAR-γ表達的影響及意義.pdf

1、支氣管哮喘是一種氣道慢性炎癥性疾病，其疾病的發(fā)生發(fā)展由多種細胞包括氣道炎癥細胞、結構細胞(如嗜酸粒細胞、肥大細胞、T淋巴細胞、中性粒細胞、平滑肌細胞和氣道上皮細胞等)和細胞組分參與。過氧化物酶體增殖物激活受體-γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ，PPAR-γ)是一種核受體超家族中的轉錄因子，其配體包括類固醇、維生素D、甲狀腺激素、維甲酸受體等。以往的研究表明，PPAR-γ是調節(jié)脂肪

2、細胞分化和脂類代謝的重要受體。最近研究發(fā)現(xiàn)，PPAR-γ在炎性細胞、呼吸道上皮、支氣管黏膜下層、呼吸道平滑肌均有表達，具有抑制炎癥、誘導細胞分化、抑制增殖、誘導凋亡等作用。PPAR-γ相關信號通路在急性肺損傷、慢性肺炎癥、肺動脈高壓、肺纖維化中發(fā)揮重要的調節(jié)作用。PPAR-γ激動劑通過作用于嗜酸粒細胞、T淋巴細胞、樹突狀細胞、肺上皮細胞等，能夠減輕過敏性哮喘小鼠呼吸道炎癥?？ń槊?BCG)是結核桿菌培養(yǎng)230代后得到的減毒活疫苗，主要用

3、于防治結核。眾多研究表明卡介苗在哮喘及變應性疾病中起重要的免疫調節(jié)作用，能夠誘導機體產生，Th1免疫反應，上調Th1反應，抑制Th2細胞功能，其機制可能與BCG誘導IFN-γ產生，降低IL-4、IL-5水平等相關。而卡介苗干預對PPAR-γ在哮喘小鼠肺組織表達產生影響及意義國內外鮮見報道。
　　 目的：通過建立小鼠哮喘模型，給小鼠進行治療性接種BCG，觀察BCG對哮喘小鼠肺組織中PPAR-γ表達的影響及可能的臨床意義。
　

4、　 方法：24只雄性昆明小鼠隨機分成正常對照組(A組)，哮喘模型組(B組)，BCG治療組(C組)。通過卵清蛋白致敏建立哮喘模型。觀察3組小鼠的一般情況；肺泡灌洗液的細胞分類；肺組織的病理切片；用RT-PCR和western blotting方法檢測肺組織中PPAR-γ mRNA和蛋白的表達。
　　 結果：
　　 1.BALF檢查顯示：
　　 哮喘模型組(B組)與正常對照組(A組)比較，BALF中白細胞總數(shù)、中性

5、粒細胞數(shù)、嗜酸性粒細胞數(shù)、淋巴細胞數(shù)和巨噬細胞數(shù)比例均明顯升高(P<0.01)。BCG治療組(C組)與哮喘模型組(B組)比較，BCG均能明顯降低BALF中白細胞總數(shù)、中性粒細胞數(shù)、嗜酸性粒細胞數(shù)和淋巴細胞數(shù)比例(P<0.05)。
　　 2.病理檢查顯示：
　　 病理學HE染色發(fā)現(xiàn)：正常對照組(A組)小鼠肺內幾乎無炎性細胞浸潤；而哮喘模型組(B組)小鼠肺內可見大量炎性細胞浸潤，其炎性細胞浸潤程度與正常對照組(A組)比較明顯

6、增加(P<0.01)。BCG接種后，炎性細胞浸潤程度較哮喘模型組(B組)明顯降低(P<0.05)。
　　 3.RT-PCR結果顯示：
　　 正常對照組(A組)小鼠肺組織中PPAR-γ mRNA高水平表達，哮喘模型誘導成功后，哮喘模型組(B組)小鼠肺組織中PPAR-γ mRNA表達水平顯著降低(P<0.01)，而BCG治療后，與哮喘模型組比較，BCG治療組(C組)小鼠肺組織中PPAR-γ mRNA表達水平明顯增加(P<0.

7、05)。
　　 4.Weatern blotting結果顯示：
　　 正常對照組(A組)小鼠肺組織中高表達PPAR-γ蛋白，哮喘模型誘導成功后，哮喘模型組(B組)小鼠肺組織中PPAR-γ蛋白表達水平顯著降低(P<0.01)，而BCG治療后，與哮喘模型組比較，BCG治療組(C組)小鼠肺組織中PPAR-γ蛋白表達水平明顯增加(P<0.05)。
　　 5.相關分析顯示：
　　 哮喘模型組(B組)小鼠肺泡灌洗液中

8、嗜酸性粒細胞數(shù)百分比與氣道炎癥呈顯著正相關(r=0.934，P<0.01)；哮喘模型組(B組)小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體PPAR-γ蛋白表達量與氣道炎癥呈顯著負相關(r=-0.954，P<0.01)，與肺泡灌洗液中嗜酸性粒細胞數(shù)百分比呈顯著負相關(r=-0.900，P<0.01)。
　　 結論：
　　 1.在支氣管哮喘小鼠模型中，肺組織中PPAR-γ表達明顯降低，并與氣道炎癥呈負相關。
　　 2.BCG治療后