DcR3與甲狀腺乳頭狀癌相關性的研究.pdf

1、目的:采用RT-PCR、Western blot、免疫組化法分別檢測甲狀腺乳頭狀癌組織與癌旁正常甲狀腺組織標本中DcR3 mRNA及蛋白的表達情況，探討DcR3在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達及臨床意義，揭示DcR3與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生發(fā)展的關系。
　　材料與方法:
　　1.材料:收集臺州學院附屬市立醫(yī)院腫瘤外科2012年2月至2013年1月間手術切除的甲狀腺乳頭狀癌組織及癌旁正常甲狀腺組織標本各50例，其中，甲狀腺乳頭狀癌組男

2、性12例，女性38例，年齡25～60歲，中位年齡41.5歲;癌旁正常甲狀腺組男性19例，女性31例，年齡28～61歲，中位年齡43歲。組織標本大小為0.5cm-1.0cm不等，一半于30 min內置于80℃冰箱保存，一半浸泡于10％的福爾馬林溶液中。所有組織標本均經醫(yī)院病理證實，患者術前均未行放化療。
　　2.方法:
　　2.1甲狀腺乳頭狀癌中DcR3 mRNA的檢測:QRT-PCR(Quantitative realtim

3、e polymerase chain reaction，QRT-PCR)法對比分析DcR3的mRNA在甲狀腺乳頭狀癌組織、甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組織中的表達情況，表達的差異采用獨立樣本t檢驗分析，P＜0.05有統(tǒng)計學意義。
　　2.2甲狀腺乳頭狀癌中DcR3蛋白的檢測:
　　2.2.1免疫組織化學法(IHC)檢測甲狀腺乳頭狀癌組織、甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組織中的DcR3蛋白表達情況，表達的差異采用獨立樣本t檢驗，P＜

4、0.05有統(tǒng)計學意義。
　　2.2.2 Western blot法檢測甲狀腺乳頭狀癌組織、癌旁正常甲狀腺組織蛋白表達高低情況，數(shù)據(jù)比較采用獨立樣本t檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計學意義。
　　結果:1.RT-PCR法檢測DcR3在甲狀腺乳頭狀癌組織中的mRNA表達量為2.0583±0.1215，與甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組相比，其在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達明顯增高，經獨立樣本t檢驗分析，P＜0.05，有統(tǒng)計學差異。2.免疫組織

5、化學法檢測示DcR3蛋白在甲狀腺乳頭狀癌組織中陽性率為48％，甲狀腺乳頭狀癌旁正常甲狀腺組織陽性率為22％，甲狀腺乳頭狀癌組織中DcR3蛋白表達的陽性率高于癌旁正常甲狀腺組織，經x2檢驗分析，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義，但DcR3蛋白的表達水平與患者性別、年齡、腫瘤大小、有無淋巴結轉移及病理分期均無相關性，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。3.Western blot法檢測DcR3蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中蛋白質表達水平為1.5527±0.

6、2102，其在癌旁正常甲狀腺組織中的蛋白質水平的表達為0.5431±0.1074，甲狀腺乳頭狀癌組織中DcR3的表達量明顯高于癌旁正常甲狀腺組織，經統(tǒng)計學分析， P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。
　　結論: DcR3在甲狀腺乳頭狀癌及癌旁正常甲狀腺組織中均有表達，與癌旁正常甲狀腺組織相比，甲狀腺乳頭狀癌組織標本中DcR3在基因轉錄和蛋白質表達水平上均表現(xiàn)為明顯增高，提示DcR3高表達可能是甲狀腺乳頭狀癌發(fā)生發(fā)展過程中一分子事件，可能起