局部應(yīng)用水蛭素對(duì)兔耳皮瓣靜脈淤血的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、目的:通過(guò)建立兔耳淤血皮瓣模型探討局部注射水蛭素對(duì)淤血皮瓣的影響。方法:健康普通大耳白兔18只,雌雄不拘,體重(2200±200g),隨機(jī)分為3組:1個(gè)對(duì)照組(A組:注射生理鹽水組)和2個(gè)治療組(B組:低分子肝素治療組；C組:水蛭素治療組),每組6只,實(shí)驗(yàn)前晚停止喂飼,按0.2 mg/kg體重、2％戊巴比妥鈉右耳緣靜脈注射麻醉,麻醉后側(cè)臥位,固定四肢,消毒鋪無(wú)菌巾。在左耳背部設(shè)計(jì)寬為3cm、長(zhǎng)為6cm的、以含耳中央血管、神經(jīng)為蒂(蒂寬1

2、cm)的軸型皮瓣。在光學(xué)放大鏡下,分離耳中央靜脈和神經(jīng),并于蒂部切斷并結(jié)扎,一并結(jié)扎其他旁支靜脈,創(chuàng)面用5-0絲線(xiàn)結(jié)扎止血。制成以耳中央動(dòng)脈為唯一血供1cm寬的蒂部為唯一靜脈回流途徑的靜脈淤血皮瓣模型。治療組分別在術(shù)后即刻,術(shù)后第1、2、3天距皮瓣蒂部1cm處三等分點(diǎn)上均勻注射水蛭素(1U/1ml/皮瓣)或低分子肝素(625IU/1ml/皮瓣),對(duì)照組同法給予等量(1ml)生理鹽水,皮瓣用5-0絲線(xiàn)原位縫合。術(shù)后觀察皮瓣顏色,表面毛發(fā)脫

3、落情況,血腫形成情況,皮瓣存活率,分別于術(shù)后1、3、5、7天取皮瓣遠(yuǎn)端皮下組織病理切片觀察皮瓣毛細(xì)血管內(nèi)血栓形成情況,中性粒細(xì)胞附壁及紅細(xì)胞聚集情況,酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)組織內(nèi)TXB2水平。術(shù)后第3、5天皮瓣遠(yuǎn)端組織病理切片顯微鏡下計(jì)數(shù)5個(gè)視野下微細(xì)血管數(shù)量,對(duì)比各組切片中微血管數(shù)量差異。結(jié)果:1大體觀察:術(shù)后第1天3組皮瓣遠(yuǎn)端均出現(xiàn)不同程度的組織腫脹淤血,但淤血范圍及程度空白對(duì)照組較水蛭治療組和肝素治療組明顯,呈暗紫

4、色,周緣可見(jiàn)較多滲出。術(shù)后第2天各組皮瓣淤血腫脹均達(dá)到高峰。術(shù)后第3天水蛭素治療組和肝素治療組皮瓣遠(yuǎn)端的淤血腫脹開(kāi)始逐漸消退,空白對(duì)照組皮瓣遠(yuǎn)端的淤血腫脹進(jìn)一步加重,局部毛發(fā)脫落,皮瓣周緣可見(jiàn)較多的組織液滲出。術(shù)后第7天水蛭素治療組和肝素治療組皮瓣基本愈合良好?？瞻讓?duì)照組皮瓣淤血組織界限分明,淤血處皮瓣毛發(fā)脫落,質(zhì)硬,深黑色瀕臨壞死。2各組皮瓣成活率比較:肝素治療組及水蛭素治療組成活面積百分比分別為(92.33±1.67)％與(94.8

5、3±1.91)％,均比空白對(duì)照組(77.9±1.18)％高,有顯著性差異(P<0.01),水蛭素治療組與肝素治療組皮瓣成活率相當(dāng),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3組織學(xué)觀察:HE染色光鏡下觀察水蛭素治療組和肝素治療組術(shù)后第1、3天,真皮內(nèi)毛細(xì)血管及微靜脈內(nèi)可見(jiàn)不同程度紅細(xì)胞聚集。皮下未見(jiàn)血栓形成,術(shù)后第5、7天毛細(xì)血管及微靜脈內(nèi)紅細(xì)胞聚集消散?？瞻讓?duì)照組術(shù)后第1、3天。真皮內(nèi)毛細(xì)血管及微靜脈內(nèi)大量紅細(xì)胞聚集,單核及中性粒細(xì)胞附壁。術(shù)

6、后第5、7天可見(jiàn)紅細(xì)聚集變性含鐵血黃素釋放染成淡黃色,皮下微靜脈血栓形成。4微血管計(jì)數(shù)取各試驗(yàn)組第3、5天病理切片,隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)顯微鏡視野下微血管數(shù)量取其均值作為該標(biāo)本的微血管數(shù),并分別與空白組比較,第3天水蛭素治療組和肝素治療組微血管數(shù)分別為6.9±0.5和6.5±0.8,空白對(duì)照組為6.4±0.9,各組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。第5天水蛭素治療組和肝素治療組微血管數(shù)分別為11.7±0.8和10.9±1.1,空白對(duì)照組為5

7、.3±0.9,其與水蛭素組和肝素組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。5TXB2檢測(cè)術(shù)后第3天,水蛭素治療組和肝索治療組TXB2含量分別為24.23±1.36和25.24±1.50與空白對(duì)照組30.97±1.45相比,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),術(shù)后第5天水蛭素治療組和肝素治療組TXB2含量分別為22.09±0.51和24.39±0.71與空白對(duì)照組37.21±1.10比較,其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。余各組相互比較差