苯磺隆分子印跡仿生酶聯(lián)免疫檢測方法研究.pdf

1、農(nóng)藥的廣泛使用對人體健康造成了危害，越來越嚴(yán)格的農(nóng)藥殘留限量值也給農(nóng)藥殘留檢測的靈敏度提出了更高的要求。本論文將分子印跡技術(shù)應(yīng)用于免疫分析當(dāng)中，建立了一種仿生酶聯(lián)免疫測定法，用來測定環(huán)境樣品中的苯磺隆殘留。
　　實(shí)驗以苯磺隆為模板分子，甲基丙烯酸為功能單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯為交聯(lián)劑，采用本體聚合法在96孔酶標(biāo)板上直接合成了對苯磺隆具有高選擇識別能力的分子印跡聚合物膜。在對聚合物膜的合成條件進(jìn)行優(yōu)化之后，通過傅立葉紅外光譜分析、

2、平衡結(jié)合實(shí)驗和吸附動力學(xué)實(shí)驗，對分子印跡膜的性能進(jìn)行了表征。實(shí)驗結(jié)果表明，苯磺隆分子印跡聚合物膜具有較高的特異性和較快的傳質(zhì)速度。在相同的實(shí)驗條件下，印跡聚合物膜的飽和吸附容量最高可達(dá)到非印跡聚合物膜飽和吸附容量的1.28倍。在苯磺隆濃度為15μgL-1時，吸附10min可達(dá)到最大吸附容量的64.8％，吸附40min能達(dá)到最大吸附容量的96.2％，吸附60min就能基本達(dá)到平衡。
　　將所制備的分子印跡膜作為仿生抗體應(yīng)用于免疫分析

3、中，建立了直接競爭仿生酶聯(lián)免疫分析方法。在最適條件下，所建立仿生酶聯(lián)免疫方法的靈敏度即IC50為15.77μgL-1，最低檢出限即IC15為0.01μgL-1。同時，該方法對苯磺隆具有較高的選擇性，對苯磺隆的三種結(jié)構(gòu)類似物的交叉反應(yīng)率為3.17％-13.10％。
　　為了驗證方法的可行性，將該方法用于水樣和土樣的苯磺隆添加回收實(shí)驗，得到水樣中的回收率為93.6％-96.8％，土樣中的回收率為87.5％-97.5％。用高效液相色譜法