葡萄糖氧化酶和辣根過氧化物酶共固定化催化手性苯甲亞砜的合成研究.pdf

1、葡萄糖氧化酶（GOX）和辣根過氧化物酶（HRP）是常用的兩種酶，前者多提取自黑曲霉發(fā)酵產物，而后者則來自天然植物辣根，兩種酶在很多領域都有極為廣泛的應用。本文對這兩種酶的共固定化條件以及共固定化酶的性質進行了研究，并對共固定化酶（HRP是主酶，GOX提供H2O2是輔助酶）催化苯甲硫醚不對稱氧化成苯甲亞砜的反應展開了研究。主要的實驗結果如下：
　　 （1）共固定的研究。選定了D380大孔陰離子交換樹脂和聚氨酯泡沫為固定化載體，采用

2、共價結合法將雙酶共固定于兩種載體。最終D380固定化酶的總酶活力可達到56 U·g-1（載體），固定化酶活得率為13％；聚氨酯泡沫固定化酶的固定化酶活得率為44％，酶活力為313 U·g-1（載體）。
　　 （2）酶學性質的研究。兩種共固定酶的最適pH都為7.0，pH穩(wěn)定性比游離酶得到了提高；固定化酶有較好的操作穩(wěn)定性，經歷10次操作后，D380固定化酶仍保留79.1％的活性，而聚氨酯泡沫固定化酶則為87.4％；兩種固定化酶的最

3、適溫度為45℃，與25℃相比相對酶活力分別達到了132％和141％；固定化酶的熱力學穩(wěn)定性也得到了提高。
　　 （3）手性苯甲亞砜的合成。兩種固定化酶用于水-有機共溶體系將苯甲硫醚的選擇性氧化苯甲亞砜的研究結果表明，該反應的產物（S）-苯甲亞砜對映體過量；游離酶無論在產物得率還是在產物ee值上都比固定化酶遜色不少；有機共溶劑以叔丁醇效果最好；苯甲硫醚的最適濃度為2.0 mM，葡萄糖最適濃度為5 mM；聚氨酯泡沫固定化酶的最適溫度