茶花多糖的分離、純化及其結(jié)構(gòu)初步探討.pdf

1、本文以茶樹花(以下簡(jiǎn)稱為茶花)為茶葉的替代原料提取多糖，并對(duì)茶花多糖的提取、分離、純化、活性以及化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，這對(duì)于研究茶花多糖類物質(zhì)的利用有重要的科學(xué)意義，并且能夠促使茶花資源得到充分利用，創(chuàng)造出良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。主要研究?jī)?nèi)容包括以下幾個(gè)部分：
　　 1)對(duì)茶花中的成分進(jìn)行了測(cè)定，包括脂肪、總糖、黃酮、多酚、蛋白質(zhì)等活性組分，其中總糖、糖醛酸、多酚、黃酮含量較高，分別為31.82％、7.42％、11.67％、10

2、.66％，與茶葉組分類似，故本課題以茶花為原料提取茶花中的多糖，并對(duì)茶花多糖做了一定的研究。
　　 2)分別探討了分級(jí)、分步醇沉對(duì)茶花多糖提取的影響，結(jié)果顯示當(dāng)醇沉濃度為30％時(shí)，醇沉出的茶花多糖占茶花總糖的85％，說明以醇沉濃度為30％時(shí)醇沉，可醇沉出大部分茶花多糖，與平時(shí)采用醇沉濃度70％醇沉多糖溶液相比，大大減少了乙醇的用量。
　　 3)研究了不同提取工藝對(duì)茶花多糖的組成及活性的影響，包括溫水提、沸水提、酶提工藝。

3、三種提取工藝相比，酶提、沸水提多糖得率相當(dāng)，約是溫水提多糖得率的五倍；酸性糖、中性糖含量，三種提取工藝相差不大；α-葡萄糖苷酶活性抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：沸水提多糖與溫水提多糖抑制率相對(duì)較高，分別為79.15％、64.62％，酶提抑制率較小，僅為16.25％(P<0.05)；DPPH分光光度法以及亞油酸體系法對(duì)茶花多糖抗氧化活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示茶花多糖具有較好的抗氧化作用；沸水提取的茶花多糖濃度為3.0μg/ml時(shí)(P<0.01)，對(duì)淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)

4、具有較強(qiáng)的促進(jìn)作用。綜合考慮應(yīng)選用沸水提取茶花多糖。
　　 4)采用大孔樹脂吸附法、陰離子交換、凝膠層析法對(duì)茶花多糖進(jìn)行分離、純化，得到了兩種均一茶花多糖TFPS1、TFPS2-2。
　　 5)利用氣相色譜、高效凝膠滲透色譜、離子色譜、紅外光譜、1H NMR和13C NMR譜等技術(shù)手段對(duì)分離得到的TFPS1、TFPS2-2的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了初步研究，并利用原子力顯微鏡觀察了TFPS1、TFPS2-2的外觀形貌。TFPS1是

5、一種含有蛋白質(zhì)的糖綴合物，分子量約500 kDa，共含9種氨基酸，分別為丙氨酸、蘇氨酸、甘氨酸、頡氨酸、絲氨酸、組氨酸、谷氨酸、天氨酸及酪氨酸，總含量約為2.03％。TFPS1由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖組成，摩爾比為1.0：2.9：0.5：1.3：3.3，單糖殘基為α-和β-兩種糖苷鍵類型相連接。其糖鏈主鏈可能由Glc、Gal組成，而支鏈可能由Ara、Gal及少量的Rha組成；TFPS2-2是一種酸性多糖，分子量為200