大米中硒形態(tài)分析方法的建立.pdf

1、　　硒是人體必需的微量元素之一,對人體和動物的生長發(fā)育至關重要。硒缺乏會影響人體健康,產(chǎn)生一些疾病,如克山病、大骨節(jié)病等,但硒攝入過多也會造成硒中毒,因此人體對硒的攝入必須在一個限制的范圍。我國有許多地區(qū)屬于缺硒地區(qū),因而硒強化顯得非常重要。目前市場上有許多硒強化產(chǎn)品,但由于其中硒形態(tài)差異較大,這些富硒產(chǎn)品不一定符合人體需求,因此必須建立一套系統(tǒng)的硒含量與硒形態(tài)檢測分析方法,以規(guī)范富硒產(chǎn)品市場。
　　本研究中主要是以大米為樣本,

2、建立快速準確、簡便可靠、低成本的硒含量與硒形態(tài)測定與分析技術。同時驗證硒在大米中的分布并研究了葉面施硒后硒在富硒稻中的轉移,為硒強化的可行性提供科學依據(jù)。
　　主要研究結果如下：
　　1.建立了總硒含量的測定方法(微波消解-原子熒光法)
　　對原子熒光光度計的儀器條件進行優(yōu)化,最佳測定條件：5%的鹽酸為載流, 20g/L硼氫化鈉溶液做還原劑,光電倍增管負高壓260V,燈電流50mA,原子化器高度8mm。并對微波消

3、解及鹽酸還原的條件這些前處理條件進行了優(yōu)化,樣品成分越復雜,消解所需的試劑也就越多,設定的程序也就越復雜,消解所需的時間也就越久。鹽酸還原的加熱溫度必須低于120℃,所需時間大概18h左右(包括趕酸時間)。該法的儀器檢出限為0.8×10-4μg/L ,相對標準偏差RSD為0.4239%。富硒米粉的加標回收率為93%~94%。普通大米硒含量在80~90μg/kg,富硒大米硒含量在150~160μg/kg。其中米糠中硒含量最高,其次是稻殼與

4、米粉。
　　2.研究了水稻的富硒效應
　　運用微波消解-原子熒光法測定富硒水稻植株各部位的硒含量,對水稻的富硒效應進行研究。根須中硒含量最高,米糠次之,精米粉中硒含量最低。通過葉面施硒,硒從葉面的氣孔進入植株內(nèi)部后,由莖進行轉運進入稻谷內(nèi)部,同時根部也對土壤中的硒進行吸收。對米粉中的淀粉、脂肪、蛋白質含量進行測定,同時測定各部分的硒含量,得知蛋白質含量很低但是硒卻主要集中在蛋白質中。又由于米糠中蛋白含量高于精米,因此稻谷

5、籽粒的米糠中硒含量高于精米。
　　3.建立無機硒與有機硒的測定方法(稀酸提取-原子熒光法)
　　由于無機態(tài)硒(SE(Ⅳ)、SE(Ⅵ))都屬于水溶性物質,因此用稀鹽酸進行提取,經(jīng)過單因素試驗與正交實驗(L9(34))對提取條件進行了優(yōu)化,優(yōu)化后的最佳條件是：鹽酸濃度為0.1mol/L,提取溫度為40℃,提取時間為8h,料液比4：1。對富硒米粉進行酸提取后再上原子熒光進行硒含量測定,提取液再經(jīng)過鹽酸還原或者微波消解后上機測定

6、,可分別獲得SE(Ⅳ)、無機硒、可溶態(tài)總硒含量,通過差減法獲得SE(Ⅵ)、有機硒、不溶態(tài)硒、可溶態(tài)有機硒的含量。利用這一方法驗證了硒在富硒大米中主要是以有機態(tài)存在,SE(Ⅳ)約占總硒含量的16.21%,SE(Ⅵ)約為6.97%,有機硒約占了76.82%。
　　4.建立有機硒化合物的測定方法(柱前衍生-HPLC法)
　　由于有機硒主要存在于蛋白質中,因此對富硒大米進行蛋白質的提取,將大米蛋白作為底物可以增加有機硒化合物的檢