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1、人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)包括甲基化、乙?;?、糖基化、磷酸化在內(nèi)的超過(guò)200種不同類型的蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTM),其中許多修飾的異常調(diào)節(jié)與細(xì)胞衰老和疾病如癌癥、心血管疾病等密切相關(guān)。研究它們的多樣性對(duì)于理解疾病發(fā)生機(jī)制乃至發(fā)現(xiàn)藥物治療靶點(diǎn)非常重要。盡管有證據(jù)闡明這些修飾的蛋白會(huì)影響細(xì)胞功能,但是由于研究方法的限制,仍然還有大量修飾的底物和修飾位點(diǎn)是不清楚的。因而對(duì)現(xiàn)有的研究方法不斷改進(jìn)和創(chuàng)新是十分有必要的。
乙酰化修飾是細(xì)胞生物調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)
2、發(fā)揮生物學(xué)功能的重要翻譯后修飾。大量的研究發(fā)現(xiàn),乙酰化在控制細(xì)胞代謝[1]、蛋白折疊、姊妹染色單體的結(jié)合中起著重要作用。還發(fā)現(xiàn)乙酰化具有調(diào)節(jié)熱量限制的有利效果,即延緩衰老的不用絕食的低營(yíng)養(yǎng)攝入[2]。研究也證明乙酰化的功能角色從酵母到哺乳動(dòng)物都是進(jìn)化上保守的。
釀酒酵母是一種廣泛應(yīng)用于研究的模式生物,它含有一些進(jìn)化上保守的賴氨酸乙酰化轉(zhuǎn)移酶和去乙?;?,因此非常適合作為乙酰化修飾的研究對(duì)象。本研究不僅有助于發(fā)現(xiàn)乙酰化修飾在應(yīng)激
3、反應(yīng)和代謝調(diào)控中扮演的角色,而且還將有助于深入研究乙?;揎椩谥T如腫瘤等疾病發(fā)生發(fā)展中的重要作用,并有助于發(fā)現(xiàn)新的藥物治療靶點(diǎn)以及研制抗腫瘤藥物,如最近報(bào)道的FDA批準(zhǔn)上市的Ⅰ型組蛋白去乙?;缚诜种苿┪鬟_(dá)苯胺[3]。
本課題針對(duì)乙酰化修飾,優(yōu)化了樣品制備和數(shù)據(jù)分析流程,建立了基于酵母體系的雙甲基標(biāo)記定量乙酰化蛋白質(zhì)組的分析流程,總共鑒定到362個(gè)高度可信的乙?;鞍滓约?46個(gè)乙?;稽c(diǎn)。并且在兩個(gè)菌株定量比較中發(fā)現(xiàn)了3個(gè)
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