家蠶天然膜蛋白Bmb019518的分離純化.pdf

1、浙江理T大學碩士學位論文浙江理工大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我恪守學術道德，崇尚嚴謹學風。所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已明確注明和引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內容。論文為本人親自撰寫，我對所寫的內容負責，并完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名：爵遺魄日期：2q7年千月2日浙江理工大學碩士學位論文摘要膜蛋白(特別是膜內在

2、蛋白)在生物體與外界環(huán)境進行物質和能量的交換以及信號傳遞等方面起著非常重要的作用。各種不同的質膜蛋白在生物膜上以通道蛋白或載體蛋白等形式存在，是維持體內穩(wěn)定內環(huán)境的重要通道。它們不僅是調節(jié)細胞新陳代謝的重要參與者，而且在電子傳遞鏈中也有著重要的作用。膜蛋白約占細胞總蛋白的l／3左右，并且大部分膜蛋白是研究新藥的潛在靶點，是新藥研發(fā)的重要領域之一。天然內膜蛋白存在于生物膜的脂類環(huán)境中，大多為疏水性的蛋白，應用常規(guī)蛋白純化方法難以將其純化。

3、本文以家蠶桿狀病毒感染的蠶蛹為材料，通過感染初期病毒出芽將宿主細胞的細胞膜剝離產生囊膜病毒，經過勻漿、差速離心、密度梯度離心獲得帶囊膜病毒后，利用高壓破碎和超速離心等一系列技術手段而獲得較純的膜結構后，采用兩性離子去垢劑(CHAPS)提取膜蛋白，利用AKTAexplorerl0蛋白純化系統(tǒng)進行離子交換層析和凝膠過濾層析來分離家蠶膜蛋白，獲得的蛋白樣品經過雙向電泳進一步分離后，通過MAIDITOFMS獲得一種家蠶膜蛋白的肽質量指紋圖譜(P