淤血對大鼠部分肝切除后早期肝再生的影響.pdf

1、[目的]在部分肝切除的基礎上建立大鼠獨立肝葉淤血的動物模型，觀察淤血對大鼠部分肝切除后早期肝再生和肝功能的影響。
　　 [方法]實驗分為兩部分：第一部分，建立大鼠獨立肝葉淤血動物模型：實驗前期進行大鼠肝臟解剖學研究，熟悉大鼠肝臟解剖，建立大鼠獨立肝葉淤血動物模型。第二部分，研究淤血對大鼠早期肝切除術后肝再生的影響：①實驗大鼠為雄性Wistar大鼠，6-8周齡，體重200-220g，術前均不禁水、食。建立70％肝切除合并尾狀葉淤血

2、動物模型與50％肝切除合并右中葉淤血動物模型。②實驗大鼠分為4組：70％肝切除合并尾狀葉淤血組(A1組)，70％肝切除組A2組(A1組的對照組)，50％肝切除組合并右中葉淤血組(B1組)，50％肝切除組B2組(B1組的對照組)，每組24只。術后不同時間(1d、2d、3d、5d)處死大鼠，每時段每組處死6只，采集血樣和肝臟標本，取樣前仔細稱量移植物重量。標本置入-80℃凍存以備進一步分析。③相關指標檢測：測血清ALT水平，評估肝細胞損傷的

3、程度(自動生化分析儀)；病理學觀察采用肝組織經10％福爾馬林固定，石蠟包埋，制成4μm厚的切片，HE染色，光鏡下觀察不同肝葉病理變化；免疫組化染色檢測PCNA并計算PCNA指數(shù)，流式細胞術檢測細胞周期并計算肝臟S期細胞比率；肝組織TNF-α測定及血中肝細胞生長因子測定采用相應試劑盒說明方法進行測定。④數(shù)據(jù)用統(tǒng)計軟件SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學處理，結果以均數(shù)±標準差表示，采用獨立樣本t檢驗，檢驗水準α=0.05。
　　 [結果

4、]
　　 第一部分：部分肝切除聯(lián)合獨立肝葉淤血動物模型穩(wěn)定，可以用于進行相關研究；
　　 第二部分：1.病理變化：實驗組淤血區(qū)域于術后第二天發(fā)生點灶狀壞死，部分區(qū)域片狀壞死，大部分肝細胞發(fā)生氣球樣變性，術后第五天時出現(xiàn)纖維組織增生；非淤血區(qū)域術后第1、2、3天時均出現(xiàn)不同比例的氣球樣變性，術后第五天非淤血區(qū)域肝組織基本恢復正常。
　　 2.肝功能變化：四組血清ALT水平均于術后第1天達到高峰，并隨時間的推移逐漸降

5、低，A1組和其對照組A2組相比較，術后第一天、第二天、第三天，A1組的ALT水平明顯高于A2組(P<0.01)，術后第五天時兩組無統(tǒng)計學差異；B1組和其對照組B2組相比，術后第一天、第二天、第三天和第五天，B1組的ALT水平明顯高于B2組(P<0.01)。
　　 3.肝再生情況：(1)肝再生指數(shù)：各組術后肝右葉肝體比隨時間推移逐漸增加，A1組和B1組，術后第一天、第二天、第三天和第五天時，肝右葉的肝體比均明顯高于其對照組(P<0

6、.01)，殘肝總體肝體比術后第一天、第二天、第三天和第五天時實驗組和對照無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；(2)PCNA指數(shù)和S期肝細胞比例：本研究發(fā)現(xiàn)增殖細胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)的表達與肝細胞S期比例的變化是基本一致的，術后第一天、第二天和第三天時A1組和B1組均高于其對照組(P<0.01)，術后第五天時無統(tǒng)計學差異；(3)HGF水平：各組HGF水平均于術后第一天達到高峰

7、，A1組和其對照組A2組相比，術后第一天、第二天和第三天，A1組血清HGF水平明顯高于A2組(P<0.01)，術后第五天時兩組相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；B1組和其對照組B2組相比，術后第一天、第二天和第三天，B1組血清HGF水平明顯高于B2組(P<0.01)，術后第五天時兩組相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；(4)TNF-α水平：術后各組肝組織勻漿中TNF-α水平均于術后第二天達到高峰，A1組和其對照組A2組相比，術后第一天、第

8、二天和第三天，A1組肝組織勻漿中TNF-α水平明顯高于A2組(P<0.01)，術后第五天時兩組相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；B1組和其對照組B2組相比，術后第一天、第二天和第三天，B1組血清肝組織勻漿中TNF-α水平明顯高于B2組(P<0.01)，術后第五天時兩組相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　 [結論]
　　 1.部分肝切除聯(lián)合獨立肝葉淤血模型穩(wěn)定，可用于相關的研究。
　　 2.術后早期，局部淤血在