TRB3與糖尿病心肌病的相關(guān)性及其機制研究.pdf

1、第一部分 TRB3與糖尿病心肌病的相關(guān)性研究
　　 目的:探討TRB3在糖尿病大鼠心肌組織中的表達及與心肌細胞凋亡和間質(zhì)纖維化的相關(guān)性。
　　 方法:24只SD雄性大鼠隨機分正常對照組12只,糖尿病組12只。采用一次性腹腔注射大劑量STZ腹腔注射的方法,建立糖尿病大鼠模型。模型建成后兩組均予以普通飲食喂養(yǎng)。成模8周后,檢測空腹血糖和糖化血紅蛋白,HE染色觀察心肌組織病理改變,Masson染色觀察心肌組織間質(zhì)膠原含量,Tu

2、nel觀察心肌細胞凋亡情況,熒光定量PCR、Western Blot分別檢測心肌組織TRB3 mRNA及蛋白水平的變化。
　　 結(jié)果:與對照組相比,糖尿病組大鼠空腹血糖及糖化血紅蛋白水平明顯升高(P＜0.01);心肌細胞排列紊亂,肌纖維溶解、萎縮、斷裂,炎癥細胞浸潤;間質(zhì)膠原表達增加(P＜0.01);心肌細胞凋亡明顯增多(P＜0.01);心肌組織TRB3 mRNA及蛋白水平表達升高(P＜0.01),糖尿病組心肌組織TRB3 mR

3、NA是對照組的5.66倍。相關(guān)性分析顯示,TRB3蛋白表達與心肌細胞凋亡成正相關(guān)(r=0.668,P＜0.05),與間質(zhì)纖維化程度成正相關(guān)(r=0.595,P＜0.05)。
　　 結(jié)論:糖尿病大鼠心肌組織中TRB3 mRNA及蛋白表達增多。TRB3可能通過促進心肌細胞凋亡,增加間質(zhì)纖維含量參與糖尿病心肌病的發(fā)病機制。
　　 第二部分高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞TRB3表達和細胞凋亡的影響及機制
　　 目的:觀察高糖對人

4、臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)TRB3表達變化和細胞凋亡的影響,探討其可能的機制。
　　 方法:調(diào)整培養(yǎng)液葡萄糖濃度,將HUVECs分成如下幾組:5.5mmol/L、15 mmol/L、25 mmol/L、35mmol/L組及5.5mmol/L組、25mmol/L組、25mmol/L+DMSO組、25mmol/L+P38MAPK特異性阻斷劑SB203580組。應用流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡率,熒光定量PCR檢測TRB3mRNA水平

5、的變化,Western Blot檢測TRB3蛋白水平的變化。
　　 結(jié)果:與5.5mmol/L組相比,15mmol/L、25mmol/L、35mmol/L組細胞凋亡及TRB3蛋白表達明顯增加(P＜0.05)。隨著培養(yǎng)液葡萄糖濃度增高,HUVECs細胞凋亡及TRB3表達逐漸增加,各組之間的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。阻斷劑SB203580預處理細胞1h后,能阻斷25mmol/L引起的細胞凋亡以及TRB3表達變化(P＜0.05