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文檔簡介
1、研究背景:
成纖維細胞生長因子21(FGF21)是成纖維細胞生長因子(FGF)家族的一員,最先由Nishimura等首次于2000年發(fā)現(xiàn),主要在肝臟及脂肪組織合成的內(nèi)分泌激素,可以以自分泌、旁分泌及內(nèi)分泌的方式發(fā)揮激素樣作用,并在糖脂代謝中起重要作用。一項新的研究發(fā)現(xiàn)FGF21的產(chǎn)生與氧化應激有關,而N-乙酰半胱氨酸(NAC)可以通過其自身-SH的還原性及脫乙?;笊?GSH的特性,使組織對抗氧化應激的能力增強。NAC能否通
2、過其抗氧化作用調(diào)節(jié)糖尿病大鼠肝臟的FGF21的表達尚未見相關報道。
研究目的:
探討NAC對于DM大鼠肝臟FGF21表達的影響。
研究方法:
1.以Wistar大鼠為實驗動物,予以一次性注射STZ(45mg/kg)建立DM大鼠模型。隨機分為NC組、DM組及DM+NAC干預組,觀察周期分別為6W和12W。
2.定期檢測大鼠一般情況及隨機血糖、血脂、肝酶學指標及MDA、SOD等指標變化。
3、r> 3.通過免疫組織化學法觀察肝臟中FGF21的表達位置及各組FGF21的相對表達量。
4.采用Western Blot法檢測6W及12W各組FGF21蛋白在肝臟中的表達變化。
5.應用實時定量PCR技術檢測6周及12周各組肝臟FGF21mRNA的相對表達量。
結(jié)果:
1.成功建立1型糖尿病大鼠模型。
2.與同期NC組大鼠比較,DM組及NAC干預組的大鼠其多飲、多尿、多食及消瘦癥狀明
4、顯,體重下降顯著(P<0.05),隨機血糖升高顯著(P<0.05)。
3.與同期 NC組比較,DM組及 NAC干預組其肝功血脂均明顯升高(P<0.01);NAC組較同期DM組相比ALT、TG均有所改善,統(tǒng)計學差異顯著(P<0.05),AST、TC有下降趨勢,但差異不顯著。
4.與同期NC組比較,DM組及NAC組其MDA水平均明顯升高,SOD活性均明顯降低(P<0.01);NAC同期 DM組相比 MDA水平有所下降,S
5、OD活性有所上升,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
5.免疫組化結(jié)果顯示FGF21表達于肝細胞胞漿,以中央靜脈周圍較豐富,與NC組相比DM組表現(xiàn)為棕黃色顆粒的先增加后減少,NAC干預組則表現(xiàn)為棕黃色顆粒的逐漸增加。
6.Western-Blot結(jié)果顯示W(wǎng)estern blot結(jié)果顯示DM6周組及NAC6周組FGF21表達量顯著高于同期NC組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。DM12周組FGF21表達量明顯低于
6、同期 NC組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),NAC干預12周組的FGF21表達量則明顯高于同期對照組。且隨著時間的延長糖尿病組FGF21蛋白表達量呈先升后降趨勢,而NAC干預組則呈逐漸上升趨勢。
7.實時定量PCR結(jié)果顯示:DM6W組FGF21mRNA相對表達顯著高于同期NC組及NAC干預6W組,統(tǒng)計學差異顯著(P<0.05);DM12 W組FGF21表達量明顯低于同期NC組及NAC干預組,統(tǒng)計學差異顯著(P<0.05)
7、。隨著觀察周期的延長,DM組及NAC干預組FGF21mRNA的表達均呈先升后降趨勢。
結(jié)論:
1.糖尿病可造成肝臟損傷,并造成氧化抗氧化系統(tǒng)的不平衡。
2.6周及12周正常對照組大鼠其肝臟FGF21mRNA相對表達量及FGF21蛋白表達量均無明顯差異。
3.與正常對照組相比,糖尿病組及NAC干預組肝臟FGF21的mRNA相對表達量均呈先升后降趨勢。
4.隨糖尿病時間的延長,糖尿病組肝臟F
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