Enniatin B誘導非小細胞肺癌凋亡過程中的作用及其機制研究.pdf

1、目的：
　　肺癌是當今世界癌癥發(fā)病率第一，在我國，其發(fā)病率與死亡率高居榜首，衛(wèi)生部統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，肺癌已經(jīng)成為中國惡性腫瘤的第一位死亡原因，成為嚴重威脅人類健康和生命的一種疾病。按組織學類型可將肺癌分為小細胞肺癌(small celllung cancer，SCLC)和非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)兩大類。非小細胞肺癌約占肺癌總數(shù)的80-85％，與小細胞癌相比，其癌細胞生長分裂較慢，

2、擴散轉移相對較晚。近些年，在化療的成效上，非小細胞肺癌確實有顯著的進步，無論是從腫瘤縮小的局部控制率上(單一藥物反應率10-30％，兩種化療藥物治療反應率35-45％)，還是從緩和病程進展、改善癥狀方面都有所突破，然而在延長病患存活時間上，即使配合放射治療、手術等，仍無明顯進展。目前，化療藥物也僅僅在化療初期明顯，可以有效誘導細胞凋亡，然而其毒副作用明顯，容易產(chǎn)生耐藥性。所以，尋找作用效率高且毒副作用小，能克服耐藥的新型誘導細胞凋亡藥物

3、成為當今肺癌治療急需解決的主要問題。
　　綜上所述，本課題研究目的在于:以非小細胞肺癌A549細胞為研究對象，對鐮刀菌菌株Enniatin B的體外抗腫瘤活性進行研究，進而探討其對體外培養(yǎng)的非小細胞肺癌A549細胞的增殖影響及凋亡的分子機制，希望通過對這些研究可以為治療肺癌和開發(fā)新型肺癌藥物提供一定的理論依據(jù)，做出積極的貢獻。
　　方法：
　　1、不同濃度的Enniatin B(1，2，3 umol/L)分別作用于三株

4、非小細胞肺癌（腺癌A549細胞）0、24、48、72小時，用MTT法檢測細胞活力。
　　2、細胞凋亡情況的檢測:流式細胞術檢測細胞凋亡率。
　　3、Western blot檢測Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表達變化。
　　結果：
　　1、Enniatin B抗凋亡活性檢測結果（MTT法檢測細胞增殖結果）
　　Enniatin B對A549細胞增殖的影響:
　　結果顯示:E

5、nniatin B下調A549增殖作用，且Enniatin B的濃度越高，作用時間越長抑制增殖越明顯，呈現(xiàn)明顯的濃度效應和時間效應。
　　2、Enniatin B誘導A549細胞凋亡的研究結果
　　流式細胞技術檢測細胞凋亡率結果:
　　結果顯示:通過流式細胞儀檢測細胞凋亡率發(fā)現(xiàn)，不同濃度的Enniatin B(1，2，3 umol/L)作用于A549細胞24小時后，Enniatin B具有較強誘導A549細胞凋亡的作用

6、，濃度越高，細胞凋亡率越高，呈現(xiàn)濃度依賴性。
　　3、Enniatin B誘導A549細胞凋亡的相關分子機制研究結果
　　Western blot檢測Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表達變化:
　　結果表明:在細胞凋亡過程中，Enniatin B同時激活了Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9，其中對Caspase-9的激活程度強于Caspase-3、Caspase-8。