鮑曼不動桿菌plsC與abrP介導替加環(huán)素耐藥機制的研究.pdf

1、目前，多重耐藥鮑曼不動桿菌已成為臨床抗感染治療面臨的一大挑戰(zhàn)。由于替加環(huán)素已顯示對其具有很好的抗菌活性，因此其在治療多重耐藥鮑曼不動桿菌感染中倍受關注。然而，隨著替加環(huán)素的廣泛使用，臨床中對替加環(huán)素耐藥的鮑曼不動桿菌已不斷被分離。目前，現(xiàn)有耐藥機制并不能完全解釋臨床菌株對替加環(huán)素耐藥的原因，本研究將從三部分逐步深入探討鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素耐藥的新機制。
　　第一部分主要對鮑曼不動桿菌19606-T8通過替加環(huán)素體外連續(xù)選擇試驗，

2、獲得替加環(huán)素耐藥菌株19606-M24。通過對菌株進行全基因組測序及應用比較基因組學發(fā)現(xiàn)三個突變可能涉及替加環(huán)素耐藥的發(fā)生，包括編碼假設蛋白基因的同義突變，基因plsC與omp38的移碼突變?；匮a野生型plsC基因可以恢復替加環(huán)素敏感性，證明plsC基因的移碼突變與替加環(huán)素耐藥相關。況且，我們通過透射電子顯微鏡與流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)基因plsC突變可以導致菌株細胞膜改變。此外，我們也評估了plsC基因具有約8％的適應性代價。總之，基因pl

3、sC在鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素耐藥的過程中發(fā)揮重要作用，該基因微弱的適應性代價有可能是造成替加環(huán)素耐藥的鮑曼不動桿菌流行的重要原因。
　　第二部分主要鑒定了鮑曼不動桿菌介導替加環(huán)素敏感性降低的基因abrP，第一次闡明了鮑曼不動桿菌abrP基因涉及替加環(huán)素敏感性降低表型及適應性代價。此外，失活abrP也可以降低其他抗菌藥物的敏感性，例如四環(huán)素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素、氯霉素和磷霉素。應用透射電子顯微鏡與流式細胞術檢測證實abrP可以影響鮑

4、曼不動桿菌細胞膜的改變。通過體外競爭與非競爭實驗證實了基因abrP具有適中的適應性代價?？傊?，這些結果顯示基因abrP在鮑曼不動桿菌抗菌藥物敏感性與適應性代價中發(fā)揮重要作用，這些抗菌藥物敏感性的改變很可能是鮑曼不動桿菌細胞膜滲透性改變的結果。
　　第三部分探討了鮑曼不動桿菌暴露于亞抑制濃度替加環(huán)素的情況下，基因在轉錄組水平的變化。研究發(fā)現(xiàn)，MFS家族的外排泵及多個涉及壓力與藥物耐藥反應的轉錄因子在暴露替加環(huán)素時出現(xiàn)上調。乙酸苯酯分