參芍口服液對2型糖尿病腎病大鼠腎臟纖維化及炎癥的影響及機制.pdf

1、目的：探究參芍口服液(Shenshao oral liquid)對糖尿病腎病(DN)大鼠炎癥及纖維化的影響及可能機制。
　　方法：本實驗采用注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)+高脂飼料(High-fat diet， HFD)喂養(yǎng)的方法復制糖尿病腎病(DN)模型。將50只SPF級Wistar大鼠于實驗動物房內適應性飼養(yǎng)7天后，隨機分為五組，對照組(Control group)、模型組(DN group)、低劑量

2、組(Low dose group)，中劑量組(Medium dose group)和高劑量組(High dose group)，每組10只，對照組(CG)用普通無菌飼料飼養(yǎng)，除對照組(CG)外各組均予以高脂飼料(HFD)飼養(yǎng)，1月后，除對照組(CG)外各組均予STZ(25mg/kg)注射于腹腔，連續(xù)測大鼠尾端血糖2次，每次均≧16.7mom/l為造模成功，待造模成功后，各組均按原來飼料飼養(yǎng)，低劑量組(LDG)用參芍口服液(SSOL)灌服

3、(125mg/k/d)，中劑量組(MDG)灌服(250mg/kg/d)，高劑量組(HDG)每天灌服(500mg/kg/d)，8周后造模結束。實驗結束前2天搜集各組大鼠24h尿液以測定24h尿微量白蛋白(Urine micro albumin,UMA)，搜集時(早晨)將每個大鼠空腹放在清洗好的代謝籠內，第二天將尿液去雜質量體積，取樣送檢驗科。處死動物前取主動脈血測定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)，取腎臟組織標本，用HE染色法光鏡下觀察

4、腎臟細胞病理形態(tài)變化，用Masson染色法觀察腎臟組織纖維化病變，用免疫組化及免疫印跡(Western blot)法檢測各組大鼠腎組織炎癥因子TLR4、NF-κB及TGF-β1蛋白表達量的改變。
　　結果：1一般情況：對照組(CG)大鼠進水、進食、神態(tài)無異常；與對照組相比模型組(DN)大鼠血糖(blood glucose)升高，進水、進食多，皮毛晦暗無光、減少、精神不振、喜臥少動、動作較慢、排除水分多。與模型組(DN)相比各藥物組

5、(The medicine group)狀況明顯好轉。2 Scr、BUN、UMA測定結果：第8周末時，模型組(DN)大鼠24h UMA、Scr、BUN的檢測值與對照組(CG)相比顯著升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；各藥物組(TMG)大鼠24h UMA、Scr、BUN的檢測值與模型組(DN)顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。3腎組織病理改變：治療8周后，與對照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎小球較大、硬化，基底膜變

6、厚、系膜區(qū)基質較多，部分腎小囊腔變狹小，各藥物組(TMG)與模型組(DN)相比病理變化較輕，間質炎癥細胞較少。4 Masson染色示與對照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎組織纖維化較重，與模型組(DN)相比各藥物組(TMG)大鼠腎組織纖維化較輕。5免疫組化示：與對照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎組織TLR4、NF-κB、TGF-β1蛋白表達量上調，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，與模型組(DN)相比各藥物組(TMG)大鼠腎組織

7、TLR4、NF-κB、TGF-β1蛋白表達量下調，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。6 Western印跡結果表明：與對照組(CG)相比模型組(DN)大鼠腎組織中TLR4、NF-κB、TGF-β1表達上調，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，與模型組(DN)相比各藥物組(TMG)顯著降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
　　結論：1參芍口服液(SSOL)具有抗炎、抗纖維化的作用，且在一定范圍內存在劑量依賴關系。2參芍口服液