CaSGT1和CaSRC2-1互作及其在PcINF1-CaSRC2-1激活辣椒免疫反應中的作用分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、前期本實驗室從辣椒疫霉 cDNA文庫中分離獲得了一個 elicitin家族成員PcINF1的全長cDNA,發(fā)現(xiàn)該蛋白可與辣椒SRC2-1蛋白結(jié)合,促發(fā)辣椒葉片產(chǎn)生HR(hypersensitive response)細胞壞死,并使辣椒防御反應相關標記基因上調(diào),但是其內(nèi)在機制并不清楚。
  本研究在此基礎上進一步分析發(fā)現(xiàn) CaSGT1參與 PcINF1/CaSRC2-1誘導的免疫反應:通過酵母雙雜交系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)CaSRC2-1與CaSG

2、T1之間存在互作,并進一步通過雙分子熒光互補(BiFC)和免疫共沉淀分析(co-IP)得到證實。在辣椒植株葉片上接種疫霉,或同時瞬間表達 PcINF1/CaSRC2-1可使 CaSGT1的轉(zhuǎn)錄表達顯著上調(diào),病毒介導 CaSGT1沉默(CaSGT1-VIGS)可顯著降低PcINF1/CaSRC2-1瞬間表達激活的辣椒葉片細胞 HR壞死、H2O2積累、防御反應相關標記基因轉(zhuǎn)錄表達的上調(diào),且CaSGT1和CaSRC2-1共同沉默比其中任何一個

3、基因單獨沉默更能降低接種疫霉導致的HR細胞壞死和防御反應相關基因表達。此外,還發(fā)現(xiàn)CaSGT1和CaSRC2-1沉默能降低彼此瞬間表達激活的HR反應,表明在辣椒免疫反應中CaSGT1和CaSRC2-1之間功能上相互依賴。尤其重要的是,我們還發(fā)現(xiàn)PcINF1的瞬間超表達、疫霉接種均可顯著增強CaSGT1和CaSRC2-1之間的互作,另一方面,CaSGT1沉默則導致PcINF1和CaSRC2-1之間的互作明顯減弱。
  上述結(jié)果表明,

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