棉花Ac-Ds標簽突變體庫構建.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩50頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、棉花是一種重要的經濟作物,近年來遭受干旱、蟲災等災害影響較大,急需培育新的品種來抵抗這些生物和非生物脅迫。目前棉花育種主要采用傳統(tǒng)的雜交育種手段,這種方法受到周期長、性狀不易發(fā)現(xiàn)等因素影響,很難快速的培育出新品種。植物基因工程技術在棉花育種上得到成功的應用。然而,目的基因的克隆是制約棉花生物技術育種的主要因素。突變體為研究基因功能和克隆基因提供了很大的便利,這就要求我們建立棉花突變體庫,進而篩選相關突變體,培育棉花新品種。棉花遺傳轉化方

2、法的建立也為運用生物學方法建立突變體庫提供可能。
   轉座子標簽法是克隆新基因的一種有效方法,它利用轉座因子插入高等植物基因組中造成基因失活,通過分析轉座因子插入位點的旁鄰序列,進而克隆該基因。利用Ac/Ds標簽系統(tǒng)構建插入突變體庫是較為理想的方法。將玉米中發(fā)現(xiàn)的Ac/Ds轉座元件構建成雙元載體系統(tǒng),利用已成熟的棉花轉基因技術(農桿菌介導法,基因槍轟擊法和花粉管通道法),將該系統(tǒng)轉到棉花基因組中,構建棉花的Ac/Ds標簽突變體

3、庫。
   通過試驗,優(yōu)化了棉花農桿菌介導法轉化程序。以生長一周的棉花無菌苗的下胚軸為外植體,MSB5添加0.1 mg/L的IAA、KT和2,4-D為誘導培養(yǎng)基,能較好的誘導出愈傷組織。3-4周繼代一次,繼代培養(yǎng)基保持IAA濃度為0.1 mg/L不變,KT和2,4-D的濃度均比前一次繼代培養(yǎng)的濃度降低0.01 mg/L。通過3-4次繼代,可獲得胚性愈傷。已經獲得品種Coker413的胚性愈傷,正在誘導分化成苗。
   運

4、用花粉管注射法獲得了轉Ac/Ds轉座元件的轉基因棉花。通過質粒濃度梯度和質粒種類對坐桃率的影響因素試驗,表明最佳質粒注射濃度為0.02 μg/μL,而質粒種類對坐桃率沒有影響。已經獲得了36父本的轉基因植株。14株轉化Ac轉座酶植株和3株轉化Ds轉座元件植株,可用做雜交,建突變體庫。
   本研究將玉米Ac/Ds轉座元件構建的雙元載體分別導入陸地棉36父本等品種中,利用Ds的可控轉座,構建陸地棉Ac/Ds標簽插入突變體庫,為棉花

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論