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文檔簡介
1、目的:本課題研究的目的是通過建立大鼠大腦中動脈缺血后再灌注的模型,用神經功能缺失行為學評分對模型予以評價;然后通過TTC染色測定梗死范圍、大鼠腦組織的組織病理學和腦血管造影等更深層次的分析再通時間與血管損傷之間的關系,為探討血管再灌注最佳時間段提供理論依據(jù)。
方法:動物分組:取健康成年SD大鼠50只,體重250~280g,周齡8~10周,隨機分為5組:正常對照組10只,實驗組40只,按梗塞后不同取栓時間分為6小時、12小時
2、、24小時、72小時共4個亞組。實驗組使用線栓法制備大鼠大腦中動脈缺血模型。各組大鼠術后進行神經功能缺失行為學評分,1~3分者入選實驗。于預定時間點拔出大鼠線栓,進行血管造影,然后斷頭取腦,使用HE染色光鏡觀察大鼠腦組織病理學改變、TTC染色確定腦梗塞范圍。對血管造影進行觀察,對一、二、三、四級血管進行計數(shù),觀察血管情況。數(shù)據(jù)應用SPSS15.0軟件統(tǒng)計。
結果:大鼠大腦中動脈缺血模型的制作成功,穩(wěn)定性高。栓塞后的大鼠均表
3、現(xiàn)出不同程度的偏癱癥狀。
大鼠腦組織TTC染色顯示,正常呈鮮紅色,梗死區(qū)呈蒼白色,隨著梗死時間的延長梗死區(qū)呈逐漸擴大趨勢。
腦組織病理學及電鏡下腦細胞超微結構顯示,24小時后梗塞中心區(qū)域出現(xiàn)大量神經元不可逆性壞死;缺血時間延長,壞死程度加重,壞死范圍擴大;缺血半暗區(qū)部分神經元可修復性壞死,多數(shù)細胞結構受損。
腦血管造影觀察:正常組血管走行正常,分支清晰:缺血6小時,梗塞側部分三、四級血管腦血管閉
4、塞、痙攣、缺失;缺血12小時,大部分三、四級腦血管閉塞、痙攣、缺失;缺血24小時,三、四級腦血管不再顯影,部分一、二級分支閉塞、痙攣、缺失;72小時,腦血管造影只剩余主干,即大腦中動脈。統(tǒng)計學分析顯示:一、二級腦血管造影計數(shù),在正常組與6小時、12小時實驗組之間無明顯差異(P>0.05),24小時、72小時實驗組與正常組、6小時、12小時實驗組比較顯示血管計數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);三、四級腦血管造影計數(shù),6小時、1
5、2小時實驗組與正常組比較顯示血管計數(shù)明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:
1.線栓法制作大腦中動脈缺血再灌注模型效果良好。經神經功能行為學評分、腦組織大體標本、TTC染色、HE染色組織及電鏡下細胞超微結構觀察等證實造模成功。
2.腦梗塞時間在24小時~72小時時,腦血管損傷程度最重,梗塞中心區(qū)神經元不可逆性壞死明顯,隨著時間的延長,壞死程度加重;缺血半暗區(qū)部分神經元壞死,多數(shù)呈可
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