玉米黑粉菌cyp51基因上游啟動(dòng)子克隆及功能鑒定.pdf_第1頁(yè)
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2、cienceCentralChinaNormalUniversitySuPervisor:DeLiLiuAcademiCTitle:ProfeSS0rSignatureAPProvedMay，2010⑧~S1sE.eoliBLZI(DE3)進(jìn)行高效表達(dá)(37oC，1.0nunoljLIPTG誘導(dǎo)36小時(shí))。結(jié)果顯示:分別在可見(jiàn)光和紫外光下觀(guān)測(cè)，轉(zhuǎn)化pETUm一GFP的大腸桿菌菌液較轉(zhuǎn)化pETGFP的菌液發(fā)出的綠色熒光亮度更高。通過(guò)構(gòu)建的

3、重組質(zhì)粒pGL一um轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞后檢測(cè)報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄活性。雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)其表達(dá)情況顯示，構(gòu)建的pGL一Um啟動(dòng)子質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組比pGL3一basic空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組的熒光素酶高出2.2倍，說(shuō)明cyP51基因上游啟動(dòng)子在細(xì)胞內(nèi)啟動(dòng)了熒光素酶基因的表達(dá)并增強(qiáng)表達(dá)效果。本文分析研究了玉米黑粉菌cyP51基因上游啟動(dòng)子序列的結(jié)構(gòu)功能，為后續(xù)工作將采用突變截短技術(shù)對(duì)獲得的上游序列做進(jìn)一步診釋也將為新型高效抗真菌新藥的研發(fā)和篩選提供理論依

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