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文檔簡介
1、梨具有花粉直感現(xiàn)象,父本授粉會影響梨果實的相關性狀。本研究優(yōu)化并建立了梨的適宜 SCoT分子標記體系。通過 SCoT標記技術,分析安徽省碭山縣的43份梨(Pyrus spp.)的遺傳多樣性和親緣關系。從43份梨材料中選取8個親緣關系不同的梨品種對碭山酥梨授粉,利用實時熒光定量 PCR分析不同授粉品種對梨木質素合成途徑中相關酶基因表達量的影響,探討異花授粉和親緣關系對碭山酥梨石細胞發(fā)育和木質素代謝的影響,為篩選適宜的碭山酥梨授粉品種提供科
2、學理論依據(jù)。
主要研究結果如下:
1.采用單因素水平設計方法,優(yōu)化并建立了梨的適宜 SCoT分子標記體系。優(yōu)化后梨 SCoT-PCR反應體系為:模板 DNA30 mg/L,引物1.0μmol/L, dNTPs0.2mmol/L, Taq DNA聚合酶1.0U,10×Easy Taq Buffer(2 mmol/L,含 Mg2+)2.5μL,總體積為25μL。隨機選取2個 DNA模板進行引物篩選,最終從67條引物中篩選
3、出16條擴增產物條帶清晰且有差異性的引物,共擴增出145條帶,其中多態(tài)性條帶有126條,多態(tài)性比率為86.1%,每條引物平均擴增出9.1條帶。
2. SCoT標記的43個梨材料具有豐富的遺傳多樣性,遺傳相似性系數(shù)范圍在0.517~0.931之間,平均值為0.685。UPGMA法聚類分析表明,在遺傳相似系數(shù)為0.690的水平上,43份梨材料分為 A和 B兩組;在遺傳相似系數(shù)為0.746的水平上,A組又分為6個亞組。
3
4、.花后39天,8個品種授粉的碭山酥梨,石細胞團個數(shù)在12.17~15.8個之間,碭山酥梨×鴨梨石細胞團個數(shù)最多;石細胞團面積范圍為22069.43μm2~46505.07μm2,碭山酥梨×紅金秋石細胞團面積最大;石細胞含量范圍為4.438%~9.454%,碭山酥梨×鴨梨石細胞含量最高;木質素含量范圍為0.017%~0.176%,碭山酥梨×若光的木質素含量最高。
花后63天,8個品種對碭山酥梨授粉,石細胞團個數(shù)在8.3~10.5
5、個之間,碭山酥梨×明月的石細胞團個數(shù)最多;石細胞團面積范圍為37596.86μm2~81260.19μm2,碭山酥梨×紅金秋的石細胞團面積最大;石細胞含量范圍為9.298%~17.197%,碭山酥梨×紅金秋的石細胞含量最大;木質素含量范圍為0.360%~0.640%,碭山酥梨×紅金秋的木質素含量最大。
花后145天,8個品種授粉的碭山酥梨,石細胞團個數(shù)在1~2.4個之間,碭山酥梨×黃花梨的石細胞團個數(shù)最多;石細胞團面積范圍為5
6、2085.73μm2~93752.80μm2,碭山酥梨×紅金秋的石細胞團面積最大;石細胞含量范圍為0.327%~1.340%,碭山酥梨×鴨梨的石細胞含量最大;木質素含量范圍為0.058%~0.448%,碭山酥梨×鴨梨的木質素含量最大。
4.在花后39天、花后63天,8個與碭山酥梨親緣關系遠近不同的品種,對碭山酥梨授粉,果實中7個木質素合成相關酶基因的表達量都較高。在花后145天,8個品種授粉的碭山酥梨中 C4H、CAD的表達量
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