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文檔簡介
1、河南大學碩士學位論文鹽脅迫誘導擬南芥氣孔關閉過程中ABA與HO信號轉導研究姓名:楊葉申請學位級別:碩士專業(yè):植物學指導教師:宋純鵬董發(fā)才2002.5.1籃胨追跨辱擬審芥乞芤哭閉遼疆中^隊茸H:02信號籜辱研覽摘要植物激素脫落酸(ABA)調節(jié)植物多種生理過程,尤其在逆境條件下,植物體內ABA大量合成,誘導氣孔關閉。從而有效調控植物體內的水分平衡。盡管人們對ABA誘導氣孔關閉的作用已取得共識,但對其信號轉導的某些細節(jié)問題仍不清楚。新篩選的擬
2、南芥ABA缺失突變體los5為研究ABA信號轉導提供了便利的條件。本文以Ios5及其相應野生型為材料,采用表皮條生物分析、激光掃描共聚焦顯微技術及膜片鉗技術研究了NaCl脅追條件下,ABA誘導保衛(wèi)細胞內H202的產(chǎn)生及二者在誘導氣孔關閉中的作用。主要結果如下:正常生長條件下。los5與野生型葉片表面氣孔的密度、形狀及氣孔開度均無明顯區(qū)別。100mMNacl可有效誘導野生型開放的氣孔關閉,而對10s5氣孔開度的影響不很明顯;100mMNa
3、Cl與lO“M的ABA共處理時,野生型及10s5氣孔開度均明顯減小,且幅度類似。該結果再次驗證了ABA在誘導氣孔關閉中的重要作用。H202可促進野生型與Ios5的氣孔關閉,而且10’1104M的H202的誘導的氣孔關閉具有可逆性,F(xiàn)DA檢測表明該濃度范圍的H202處理時保衛(wèi)細胞保持良好的活性;104M的H202的誘導的氣孔關閉不可逆,并伴隨著保衛(wèi)細胞活性的喪失。H202的清除劑cAT(20u,m1)和Vc(10mM)可以部分逆轉Nacl
4、誘導的野生型氣孔關閉,也可部分逆轉NaclABA誘導的野生型及l(fā)os5的氣孔關閉,但CAT和vc對Nacl處理時los5的氣孔開度無明顯影響,而且cAT和Vc分別單獨處理時促進氣孔開放的作用也非常微弱。這些結果說明Nacl脅迫條件下,ABA誘導了氣孔關閉,而且,H202可能是ABA信號轉導鏈的一個中間成分。以H202熒光探針H歸CFDA結合激光掃描共聚焦顯微技術直接檢測了保衛(wèi)細胞內的H20】產(chǎn)生情況。未加任何處理之前,野生型與los5保
5、衛(wèi)細胞內熒光強度幾乎相等。外源100mMNacl處理時野生型保衛(wèi)細胞內熒光顯著增強,而los5保衛(wèi)細胞內熒光只有輕微的增強處理15分鐘時,野生型保衛(wèi)細胞內熒光強度為los5的217倍:lOOmMNacI與10州ABA共處理可誘導野生型及Ios5胞內熒光均迅速增強,5分鐘時熒光已布滿整個細胞。胞外vc(10mM)可完全阻斷NaCl及NaCIABA誘導的熒光增強,而胞外cAT(20u,m1)只能抑制Nacl及NaclABA處理時保衛(wèi)細胞質膜
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