鹽脅迫誘導擬南芥氣孔關閉過程中ABA與H-,2-O-,2-信號轉導研究.pdf

1、河南大學碩士學位論文鹽脅迫誘導擬南芥氣孔關閉過程中ABA與HO信號轉導研究姓名：楊葉申請學位級別：碩士專業(yè)：植物學指導教師：宋純鵬董發(fā)才2002.5.1籃胨追跨辱擬審芥乞芤哭閉遼疆中^隊茸H：02信號籜辱研覽摘要植物激素脫落酸(ABA)調節(jié)植物多種生理過程，尤其在逆境條件下，植物體內ABA大量合成，誘導氣孔關閉。從而有效調控植物體內的水分平衡。盡管人們對ABA誘導氣孔關閉的作用已取得共識，但對其信號轉導的某些細節(jié)問題仍不清楚。新篩選的擬

2、南芥ABA缺失突變體los5為研究ABA信號轉導提供了便利的條件。本文以Ios5及其相應野生型為材料，采用表皮條生物分析、激光掃描共聚焦顯微技術及膜片鉗技術研究了NaCl脅追條件下，ABA誘導保衛(wèi)細胞內H202的產(chǎn)生及二者在誘導氣孔關閉中的作用。主要結果如下：正常生長條件下。los5與野生型葉片表面氣孔的密度、形狀及氣孔開度均無明顯區(qū)別。100mMNacl可有效誘導野生型開放的氣孔關閉，而對10s5氣孔開度的影響不很明顯；100mMNa

3、Cl與lO“M的ABA共處理時，野生型及10s5氣孔開度均明顯減小，且幅度類似。該結果再次驗證了ABA在誘導氣孔關閉中的重要作用。H202可促進野生型與Ios5的氣孔關閉，而且10’1104M的H202的誘導的氣孔關閉具有可逆性，F(xiàn)DA檢測表明該濃度范圍的H202處理時保衛(wèi)細胞保持良好的活性；104M的H202的誘導的氣孔關閉不可逆，并伴隨著保衛(wèi)細胞活性的喪失。H202的清除劑cAT(20u，m1)和Vc(10mM)可以部分逆轉Nacl

4、誘導的野生型氣孔關閉，也可部分逆轉NaclABA誘導的野生型及l(fā)os5的氣孔關閉，但CAT和vc對Nacl處理時los5的氣孔開度無明顯影響，而且cAT和Vc分別單獨處理時促進氣孔開放的作用也非常微弱。這些結果說明Nacl脅迫條件下，ABA誘導了氣孔關閉，而且，H202可能是ABA信號轉導鏈的一個中間成分。以H202熒光探針H歸CFDA結合激光掃描共聚焦顯微技術直接檢測了保衛(wèi)細胞內的H20】產(chǎn)生情況。未加任何處理之前，野生型與los5保

5、衛(wèi)細胞內熒光強度幾乎相等。外源100mMNacl處理時野生型保衛(wèi)細胞內熒光顯著增強，而los5保衛(wèi)細胞內熒光只有輕微的增強處理15分鐘時，野生型保衛(wèi)細胞內熒光強度為los5的217倍：lOOmMNacI與10州ABA共處理可誘導野生型及Ios5胞內熒光均迅速增強，5分鐘時熒光已布滿整個細胞。胞外vc(10mM)可完全阻斷NaCl及NaCIABA誘導的熒光增強，而胞外cAT(20u，m1)只能抑制Nacl及NaclABA處理時保衛(wèi)細胞質膜