RLKs抑制劑ON01910結構類似物的設計、合成及初步抗腫瘤活性研究.pdf

1、Plks(Polo-likekinase)的異常表達與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的聯(lián)系，研究已證實Plks在多種腫瘤細胞中均過量表達。Plks是一種在分裂細胞中表達的絲氨酸/蘇氨酸激酶，作用于有絲分裂過程，促進細胞增殖，其含量在細胞周期M期達到峰值。鑒于在細胞增殖過程中的重要作用及其高度保守的結構，Plks成為治療惡性腫瘤的重要靶標分子，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一系列的Plks抑制劑而且它們的抗腫瘤活性已在大量的體內外活性研究中得以證實。其中，ON01

2、910作為一種有效的Plks抑制劑已經(jīng)進入臨床三期研究階段，該化合物對多種腫瘤細胞（包括一些抗藥性的細胞株）的半數(shù)抑制濃度在納摩爾濃度范圍內。ON01910的藥物代謝動力學性質表現(xiàn)為血漿蛋白結合率高，消除快，半衰期短，而且低劑量給藥時主要在肝臟中消除，高劑量給藥時則主要通過尿排泄。更有組織分布研究表明，肝中的藥物蓄積最多，其次是腎，不良反應主要表現(xiàn)為輕微的血液毒性和肝損傷，并無嚴重的骨髓抑制、神經(jīng)病變或心臟毒性。
　　基于me-t

3、oo藥物研發(fā)的一般策略，本文對ON01910進行專利研究并分析總結該類化合物的構效關系，進行局部結構改造，以改變藥物的酸堿性、脂水分布系數(shù)、體內代謝轉化的方向與延長作用時間。同時嘗試通過拆分或手性立體合成，將外消旋體類似物兩種構型的異構體分別進行研究。另一方面引入羥肟酸基團，使之以前藥形式給藥，改善ON01910在體內的ADME過程，提高生物利用度，而且可發(fā)揮羥肟酸與金屬離子的螯合作用，作用于HDAC、APN、MMP等金屬蛋白酶，影響多

4、條信號通路而抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。以4-甲氧基-3-硝基甲苯為起始原料，經(jīng)NBS溴代、巰基乙酸(TGA)親核取代、30％H2O2氧化、與2，4，6-三甲氧基苯甲醛縮合、硝基還原及溴乙酸甲酯(BAM)親核取代生成(E)2-（2-甲氧基-5-（（2，4，6-三甲氧基苯乙烯基磺?；┘谆┢S胺）乙酸甲酯(L6)，L6結構中羧酸甲酯結構被NaOH水解成羧酸(L7)或者與羥胺鉀反應引入羥肟酸基團(L8)，同時L7分別與氨基乙醇、賴氨酸、精氨酸、膽堿

5、、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氫氧化鉀和氫氧化鈉生成對應的鹽(L9～L16)，而且通過相似的制備方法，合成了具有亞磺?；Y構的類似化合物，結構經(jīng)ESI-MS及1H-NMR驗證。
　　除對ON01910類似物進行研究之外，本文在拼合原理的基礎上設計合成了4個α-硫辛酸衍生物，其中化合物Ⅰ2、Ⅰ3由具有光學活性的硫辛酸制得，化合物Ⅱ則通過外消旋α-硫辛酸與抗癌輔助劑替拉扎明(TPZ)縮合制得，目標化合物具有顯著的抑制腫瘤細胞增殖活性，為該類化

6、合物的設計與合成提供新思路。
　　本文最后對目標化合物的抗腫瘤活性進行了初步研究。首先，用熒光測定法驗證了L8、L21及Ⅰ1、Ⅱ對HDAC酶具有中等抑制活性。同時，采用MTT法測定了目標化合物對ES-2，K562，PC-3，MDA-MB-231、A549及U937細胞株的抑制增殖活性，結果表明這些化合物都具有較好的細胞毒活性，尤其是L7～8、L21～22，對被測定的三株細胞的IC50值均在1μmol·L-1以下。最后以PLC人肝癌